色譜柱要滿足哪些使用要求你知道嗎,?
閱讀:389 發(fā)布時間:2021-3-22
色譜是一種分離分析手段,,分離是核心,,因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高,、選擇性好,,分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料好多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相,、氧化鋁,、有機聚合物微球(包括離子交換樹脂)、多孔碳等,,其粒度一般為3,,5,7,,10UM等,,柱效理論值可達5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效;對于同系物分析,,只要500即可;對于較難的分離物質(zhì)對則可采用高達2萬的柱子,,因此一般10~30CM左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。
柱效受柱內(nèi)外因素影響,,為使色譜柱達到效率,,除柱外死體積要小外,不要有合理的柱結(jié)構(gòu)(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術(shù),。即使好的裝填技術(shù),,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,靠近管壁的部位比較疏松,,易產(chǎn)生溝流,,流速較快,影響沖洗劑的流形,,使譜帶加寬,。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍料徑的厚度。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,,柱外效應(yīng)對柱效的影響遠遠大于管壁效應(yīng),。
色譜柱由柱管、壓帽,、卡套(密封環(huán)),、篩板(濾片),、接頭、螺絲等組成,。柱管多用不銹鋼制成,,壓力不高于70KG/CM2時,也可采用厚壁玻璃或石英管,,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度,。為提高柱效,減小管壁效京,,不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光,。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光相同還有使用熔融硅或玻璃襯里的,,用于細管柱,。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金,,孔徑0.2-20um(5-10um),,取決于填料粒度,目的是防止填料漏出,。