國產(chǎn)共焦顯微鏡[ConfocalLaserScanningMicroscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一塊半反半透鏡(BeamSplitter),,將已經(jīng)通過透鏡的反射光折向其它方向,在其焦點(diǎn)上有一個(gè)帶有針孔(Pinhole)的擋板,,小孔就位于焦點(diǎn)處,,擋板后面是一個(gè)光電倍增管(photomultipliertube,PMT),。
可以想像,,探測(cè)光焦點(diǎn)前后的反射光通過這一套共焦系統(tǒng),必不能聚焦到小孔上,,會(huì)被擋板擋住,。于是光度計(jì)測(cè)量的就是焦點(diǎn)處的反射光強(qiáng)度。
應(yīng)用領(lǐng)域:
涉及醫(yī)學(xué),、動(dòng)植物科研,、生物化學(xué)、細(xì)菌學(xué),、細(xì)胞生物學(xué),、組織胚胎、食品科學(xué),、遺傳,、藥理,、生理、光學(xué),、病理,、植物學(xué)、神經(jīng)科學(xué),、海洋生物學(xué),、材料學(xué)、電子科學(xué),、力學(xué)、石油地質(zhì)學(xué),、礦產(chǎn)學(xué),。
基本原理:
傳統(tǒng)的國產(chǎn)共焦顯微鏡使用的是場(chǎng)光源,標(biāo)本上每一點(diǎn)的圖像都會(huì)受到鄰近點(diǎn)的衍射或散射光的干擾;激光掃描共聚焦顯微鏡利用激光束經(jīng)照明針孔形成點(diǎn)光源對(duì)標(biāo)本內(nèi)焦平面的每一點(diǎn)掃描,,標(biāo)本上的被照射點(diǎn),,在探測(cè)針孔處成像,由探測(cè)針孔后的光電倍增管(PMT)或冷電耦器件(cCCD)逐點(diǎn)或逐線接收,,迅速在計(jì)算機(jī)監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像,。照明針孔與探測(cè)針孔相對(duì)于物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點(diǎn)同時(shí)聚焦于照明針孔和發(fā)射針孔,,焦平面以外的點(diǎn)不會(huì)在探測(cè)針孔處成像,,這樣得到的共聚焦圖像是標(biāo)本的光學(xué)橫斷面,克服了普通顯微鏡圖像模糊的缺點(diǎn),。
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