技術文章
導電組織生物打印方案
閱讀:138 發(fā)布時間:2024-2-4
概述
3D石墨烯(3DG)是一種生物相容性導電材料,用于打印電刺激組織,,如心臟,、骨骼肌和神經,以及生物相容性電路,。3DG在室溫下打印,,打印后可以接種細胞。按照以下分步過程進行導電組織生物打印,。
下面用戶說明中提供的推薦制劑可產生一種簡化的可打印生物材料,,可創(chuàng)建可重復的 3D 打印結構。但是,,用戶可以根據(jù)自己的需要修改準備工作,。
材料
3 mL Dimension Inx 3D-石墨烯
生物墨水混合器
5 mL 注射器
14G金屬拉絲針
27G打印針
砂紙印刷面
培養(yǎng)皿
間充質干細胞或其他選擇的細胞系
間充質干細胞生長培養(yǎng)基
方法
印刷:
將小瓶從 4°C 中取出,使其達到室溫;
當材料從冰箱中取出時,,它看起來會變硬,,所以在處理之前等待它看起來很流暢;
用生物墨水混合器劇烈渦旋材料,直至均勻;
注意:如果材料溶劑似乎大部分與粉末分離,,您可以用膠帶將小瓶固定在渦旋混合器上,,并保持至少一小時,。長時間混合小瓶將獲得更好的打印體驗。
使用 14G 針頭刺穿樣品瓶蓋并繪制打印量 (3 mL),,不要將樣品瓶倒置以防止材料損失,。3D-石墨烯具有高粘性,因此加載可能需要幾分鐘,。我們建議您僅將此樣品瓶用于一次打印會話,。如果您將其用于更多會話,請確保將其適當密封,。建議將刺破的蓋子換成實心蓋子,,以便更好地進一步存放;
拉拔材料后,取下注射器柱塞和拉絲針;
從柱塞上取下塞子并將其放入注射器中;
將塞子放回注射器中,,用柱塞推動它,,直到它接觸并均勻分布在注射器中的拉出材料。確保在用柱塞推動塞子時,,它們不會重新連接;
放置 27G 打印針并裝入您的 Allevi,!
將粘合劑打印表面放在培養(yǎng)皿上。
印后:
在處理之前,,讓您的打印結構在通風櫥中靜置至少 2 小時,。請注意,打印件在洗滌前可以無限期地存放在密封的玻璃容器中;
將打印的結構浸入 70% 乙醇中至少 1 小時,。建議輕柔攪拌,。更換乙醇,讓您的物體再浸入水中一個小時;
用PBS(用于生物應用的無菌PBS)代替乙醇,,并立即使用,。如果您想存儲此對象,請將其冷凍在 -20 ?C,、– 40 ?C 或 -80 ?C;
如果您沒有使用我們的盤子并且您的結構與您的表面融合,,請小心地使用剃須刀片將其取下。如果您確實使用過我們的盤子,,只需戴上手套取下您的結構即可;
如果您愿意,,您可以用剪刀、手術刀,、活檢打孔機等切割您的指紋,。
細胞接種:
從打印的結構中吸出多余的液體,但不要讓它干燥,。細胞接種時應略微濕潤;
10-15 μL 應接種在直徑 5 mm,、厚 1 mm 的印刷構建體中;
對于此應用,建議以 5 x 10 的密度接種間充質干細胞6細胞/mL。
凝膠也可以注射到生物打印和洗滌的物體中,。
打印設置
速度 (mm/s) | 層高 (mm) | 噴嘴直徑 (mm) | 軌距 | 壓力 (psi) | 打印溫度 (°C) |
---|---|---|---|---|---|
16 | 0.2 | 0.2 | 27 | 10-20 | 室溫 |
應用
骨組織:天然骨骼封裝在神經和肌肉組織中,,因此將 3DG 與 HB 一起打印可能會產生多組織單元。
心臟,、神經和骨骼肌組織:3DG 非常適合需要導電的組織,。由于其導電性,3DG可以傳輸對心臟,、神經和骨骼肌功能至關重要的電信號,。
生物相容性和柔性電路:隨心所欲地打印電路,用細胞接種它們并運行電流進行刺激,。
警告
請勿將液體形式的 3DG 存放在塑料容器中數(shù)小時,,否則會變干,。打印前盡量限制所有空氣暴露,,以確保佳打印體驗;
使用比提供的針頭規(guī)格更高(噴嘴直徑更小)的針頭進行打印可能會導致間歇性堵塞;
不要讓液態(tài)3DG與黑色金屬長時間接觸,,它會腐蝕它們,。也不要讓它與聚酯或聚苯乙烯接觸,它會與它們融合,。
不要讓 3DG 達到 70 ?C 以上的溫度,,否則會熔化。
不要試圖用熱,、蒸汽,、環(huán)氧乙烷或過氧化氫對打印結構進行滅菌。該材料含有二氯甲烷,、2-丁氧基乙醇和鄰苯二甲酸二丁酯,。
僅用于研究目的。不供人類或臨床使用,。