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使用超彈性骨的生物打印骨組織
閱讀：117 發(fā)布時(shí)間：2024-2-4
概述
超彈性骨™是由 Dimension Inx 制成的一種材料,，由超過 90% 的羥基磷灰石組成，羥基磷灰石是一種來自骨組織的天然礦物質(zhì),。超彈性骨™在室溫下打印,，打印后可以接種細(xì)胞。使用此分步方案使用超彈性骨骼對(duì)骨組織進(jìn)行生物打印,。
下面用戶說明中提供的推薦制劑產(chǎn)生了一種簡化的可打印生物材料,，可創(chuàng)建可重復(fù)的 3D 生物打印結(jié)構(gòu)。但是,，用戶可以根據(jù)自己的需要修改準(zhǔn)備工作,。
材料
3 mL Dimension Inx 超彈性骨™（注：本產(chǎn)品已停售）
生物墨水混合器
5 mL 注射器
14G金屬拉絲針
27G金屬印針
砂紙印刷面
間充質(zhì)干細(xì)胞
間充質(zhì)干細(xì)胞生長培養(yǎng)基
骨組織生物打印方法
印刷：
將小瓶從 4°C 中取出，使其達(dá)到室溫;
材料從冰箱中取出時(shí)看起來會(huì)變硬,，因此在處理之前請(qǐng)等待它看起來是流動(dòng)的（這可能需要一個(gè)多小時(shí),，并且根據(jù)室溫而有所不同）;
使用生物墨水混合器劇烈渦旋材料，直到其均勻（這可能需要幾分鐘）;
注意：如果材料溶劑似乎大部分與粉末分離,，您可以用膠帶將小瓶固定在渦旋混合器上,，并保持至少一小時(shí)。長時(shí)間混合小瓶將獲得更好的打印體驗(yàn),。
使用 14G 針頭刺穿樣品瓶蓋并繪制打印量 （3 mL）,，不要將樣品瓶倒置以防止材料損失。超彈性骨™骼具有高度粘性,，因此加載可能需要幾分鐘,。我們建議您僅將此樣品瓶用于一次打印會(huì)話。如果您將其用于更多會(huì)話,，請(qǐng)確保將其適當(dāng)密封,。建議將刺破的蓋子換成實(shí)心蓋子，以便更好地進(jìn)一步存放;
拉拔材料后,，取下注射器柱塞和拉絲針;
從柱塞上取下塞子并將其放入注射器中;
將塞子放回注射器中,，用柱塞推動(dòng)它，直到它接觸并均勻分布在注射器中的拉出材料,。確保在用柱塞推動(dòng)塞子時(shí),，它們不會(huì)重新連接;
放置 27G 打印針并裝入您的 Allevi！
將粘合劑打印表面放在培養(yǎng)皿上,。
印后：
在處理之前,，讓您的打印結(jié)構(gòu)在通風(fēng)櫥中靜置至少 2 小時(shí)。請(qǐng)注意,，打印件在洗滌前可以無限期地存放在密封的玻璃容器中;
將打印的結(jié)構(gòu)浸入 70% 乙醇中至少 1 小時(shí),。建議輕柔攪拌,。更換乙醇，讓您的物體再浸入水中一個(gè)小時(shí);
用PBS（用于生物應(yīng)用的無菌PBS）代替乙醇,，并立即使用,。如果您想存儲(chǔ)此對(duì)象，請(qǐng)將其冷凍在 -20 ?C,、– 40 ?C 或 -80 ?C;
如果您沒有使用我們的盤子并且您的結(jié)構(gòu)與您的表面融合,，請(qǐng)小心地使用剃須刀片將其取下。如果您確實(shí)使用過我們的盤子,，只需戴上手套取下您的結(jié)構(gòu)即可;
如果您愿意,，您可以用剪刀、手術(shù)刀,、活檢打孔機(jī)等切割您的指紋,。
細(xì)胞接種：
從打印的結(jié)構(gòu)中吸出多余的液體，但不要讓它干燥,。細(xì)胞接種時(shí)應(yīng)略微濕潤;
10-15 μL 應(yīng)接種在直徑 5 mm,、厚 1 mm 的印刷構(gòu)建體中;
凝膠也可以注射到生物打印和洗滌的物體中。
打印設(shè)置
| 速度 （mm/s） | 層高 （mm） | 噴嘴直徑 （mm） | 軌距 |
| 26 | 0.2 | 0.2 | 27 |
| 壓力 （psi） | 交聯(lián)（秒） | 打印溫度 （°C） |
| ~30-40 | 0 | 室溫 |
生物打印骨組織的警告
不要將液體形式的超彈性骨™存放在塑料容器中數(shù)小時(shí),，否則會(huì)變干,。打印前盡量限制所有空氣暴露，以確保佳打印體驗(yàn);
使用比提供的針頭規(guī)格更高（噴嘴直徑更?。┑尼橆^進(jìn)行打印可能會(huì)導(dǎo)致間歇性堵塞;
不要讓液體形式的超彈性骨™長時(shí)間接觸黑色金屬,，它會(huì)腐蝕它們。
不要讓超彈性骨™與聚酯或聚苯乙烯接觸,，它會(huì)與它們?nèi)诤稀?/p>
不要讓超彈性骨™達(dá)到 70 ?C 以上的溫度,，否則它會(huì)融化。
不要試圖用熱,、蒸汽,、環(huán)氧乙烷或過氧化氫對(duì)打印結(jié)構(gòu)進(jìn)行滅菌。該材料含有二氯甲烷,、2-丁氧基乙醇和鄰苯二甲酸二丁酯,。
僅用于研究目的。不供人類或臨床使用,。
