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菌落總數(shù)檢測(cè)儀計(jì)數(shù)對(duì)樣品稀釋的介紹

閱讀:2079          發(fā)布時(shí)間:2021-3-2
   菌落總數(shù)檢測(cè)儀通過國標(biāo)法測(cè)菌落總數(shù)是以檢樣中的細(xì)菌細(xì)胞和平板計(jì)數(shù)瓊脂混合后,,每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞都能形成一個(gè)可見的單獨(dú)菌落的假定為基礎(chǔ)的。由于檢驗(yàn)中采用37℃于有氧條件下培養(yǎng),,因而并不能測(cè)出每g或ml檢樣中實(shí)際的總活菌數(shù),,厭氧菌、微嗜氧菌和冷營菌在此條件下不生長,,有特殊營養(yǎng)要求的一些細(xì)菌也受到了限制,,因此所得結(jié)果,只包括一群能在普通平板計(jì)數(shù)瓊脂中發(fā)育,、嗜中溫的,、需氧和兼性厭氧的細(xì)菌菌落的總數(shù)。
  對(duì)于樣品的稀釋問題要注意:
  1.檢樣稀釋時(shí),,無菌稱取(或量取)有代表性的樣品25g(或ml)剪碎放于含有225ml滅菌稀釋液的玻璃瓶內(nèi),,經(jīng)充分振搖作成1:10的稀釋液。制備10倍系列稀釋的樣品勻液時(shí),,每一步都應(yīng)該搖勻試管或反復(fù)吹吸,,使菌體能夠盡量分散均勻,。如系肉,、魚等固體樣品,剪細(xì)于滅菌乳缽內(nèi)與稀釋液研勻,,或與稀釋液同置于滅菌均質(zhì)器杯中,,以8000-10000rpm速度攪拌1分鐘,使做成均勻的1:10稀釋液,。對(duì)于像食醋或酸性飲料等酸度較高的樣品,,如果直接用原樣液來檢測(cè)菌落總數(shù),結(jié)果會(huì)偏低甚至為0,,只有嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)要求先用滅菌的20-30%碳酸鈉溶液將其PH值調(diào)至中性后方可準(zhǔn)確檢測(cè)出菌落總數(shù),。
  2.根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)?biāo)本污染情況的估計(jì),將上述1:10的檢樣稀釋液再做成幾個(gè)適當(dāng)?shù)?0倍遞增稀釋液,。即取1:10稀釋液1ml與9ml稀釋液混和做成1:100的稀釋液,,然后依次遞增稀釋,做成1:1 000,、1:10000等稀釋液,。注意每遞增稀釋一次,必須另換1支1ml滅菌吸管,,這樣所得檢樣的稀釋倍數(shù)方為準(zhǔn)確,。
  3.從吸管筒內(nèi)取出滅菌吸管時(shí),,不要將吸管尖部碰著其他仍留在容器內(nèi)的吸管的外露部分;而且吸管在進(jìn)出裝有稀釋液的玻璃瓶和試管時(shí),,也不要觸及瓶口及試管口的外側(cè)部分,;因?yàn)檫@些部分都可能接觸過手或其他沾污物。
  4.在作10倍遞增稀釋中,,吸管插入檢樣稀釋液內(nèi)不能低于液面2.5cm,;吸入液體時(shí),應(yīng)先高于吸管刻度,,然后提起吸管尖部離開液面,,將尖部貼于玻璃瓶或試管的內(nèi)壁使吸。管內(nèi)液體調(diào)至所要求的刻度,,這樣取樣較準(zhǔn)確,,而且在吸管從稀釋液內(nèi)取出時(shí)不會(huì)有多余的液體粘附于管外。
  5.當(dāng)用吸管將檢樣稀釋液加至另一裝有9mL空白稀釋液的試管內(nèi)時(shí),,應(yīng)小心沿管壁加入,,不要觸及管內(nèi)稀釋液,以防吸管尖部外側(cè)部分粘附的檢液也混入其中,。

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