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多樣的微生物菌落計(jì)數(shù)方法為您總結(jié)！
閱讀：5845 發(fā)布時(shí)間：2021-1-19
菌落總數(shù)檢測(cè)儀主要用于計(jì)數(shù)培養(yǎng)基培養(yǎng)出來(lái)的菌落群,，為壓力感應(yīng)式，適用各種計(jì)數(shù)筆,，壓力敏感度可調(diào),。*的按鈕設(shè)計(jì)，計(jì)數(shù)錯(cuò)誤時(shí),，可將數(shù)值往后退,。配有可調(diào)節(jié)的培養(yǎng)皿支架以及非閃爍式圓形燈管，減少眼睛的疲勞,。
對(duì)于菌落總數(shù)的計(jì)數(shù)方法有很多,，今天我們主要介紹幾種常見(jiàn)的：
1.染色計(jì)數(shù)法
為彌補(bǔ)一些微生物在油鏡下不易觀(guān)察計(jì)數(shù)，而直接用血球計(jì)數(shù)板法又無(wú)法區(qū)分死細(xì)胞和活細(xì)胞的不足,，人們發(fā)明了染色計(jì)數(shù)法,，借助不同的染料對(duì)菌體進(jìn)行適當(dāng)?shù)娜旧梢愿奖愕脑陲@微鏡下進(jìn)行活菌計(jì)數(shù),。如酵母活細(xì)胞計(jì)數(shù)可用美藍(lán)染色液,，染色后在顯微鏡下觀(guān)察,，活細(xì)胞為無(wú)色，而死細(xì)胞為藍(lán)色,。
2.比例計(jì)數(shù)法
將已知顆粒濃度的液體與一待測(cè)細(xì)胞濃度的菌液按一定比例均勻混合,，在顯微鏡視野中數(shù)出各自的數(shù)目，即可得未知菌液的細(xì)胞濃度,，這種計(jì)數(shù)方法比較粗放,，并且需要配制已知顆粒濃度的懸液做標(biāo)準(zhǔn)。
3.液體稀釋法
對(duì)未知菌樣做連續(xù)十倍系列稀釋?zhuān)鶕?jù)估計(jì)數(shù),，從適宜的三個(gè)連續(xù)的10倍稀釋液中各取5毫升試樣,，接種1毫升到3組共15只裝培養(yǎng)液的試管中，經(jīng)培養(yǎng)后記錄每個(gè)稀釋度出現(xiàn)生長(zhǎng)的試管數(shù),，然后查大或然數(shù)表MPN得出菌樣的含菌數(shù),，根據(jù)樣品稀釋倍數(shù)計(jì)算出活菌含量。該法常用于食品中微生物的檢測(cè),，例如飲用水和牛奶的微生物*,。
4.平板菌落計(jì)數(shù)法
這是一種常用的活菌計(jì)數(shù)法。將待測(cè)菌液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)∫欢w積的稀釋菌液與合適的固體培養(yǎng)基在凝固前均勻混合,，或?qū)⒕和坎加谝涯痰墓腆w培養(yǎng)基平板上。保溫培養(yǎng)后,，用平板上出現(xiàn)的菌落數(shù)乘以菌液稀釋度,，即可算出原菌液的含菌數(shù)。一般以直徑9cm的平板上出現(xiàn)50-500個(gè)菌落為宜,。但方法比較麻煩,，操作者需有熟練的技術(shù)。平板菌落計(jì)數(shù)法不僅可以得出菌液中活菌的含菌數(shù),，而且同時(shí)將菌液中的細(xì)菌進(jìn)行了一次分離培養(yǎng),，獲得了單克隆。
5.試劑紙法
在平板計(jì)數(shù)法的基礎(chǔ)上,，發(fā)展了小型商品化產(chǎn)品以供快速計(jì)數(shù)用,。形式有小型厚濾紙片，瓊脂片等,。在濾紙和瓊脂片中吸有合適的培養(yǎng)基,，其中加入活性指示劑2，3,，5-氯化三苯基四氮唑(TTC,，無(wú)色)待蘸取測(cè)試菌液后置密封包裝袋中培養(yǎng)。短期培養(yǎng)后在濾紙上出現(xiàn)一定密度的玫瑰色微小菌落與標(biāo)準(zhǔn)紙色板上圖譜比較即可估算出樣品的含菌量,。試劑紙法計(jì)數(shù)快捷準(zhǔn)確,，相比而言避免了平板計(jì)數(shù)法的人為操作誤差。