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一個(gè)使用了120年的依舊年輕的技術(shù)-凱氏定氮
閱讀:504 發(fā)布時(shí)間:2024-2-22凱氏定氮法是由丹麥化學(xué)家凱道爾于1883年建立的。
凱氏定氮法是測(cè)定化合物或混合物中總氮量的一種方法,。即在有催化劑的條件下,,用濃硫酸消化樣品將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無機(jī)銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨,,隨水蒸氣蒸餾出來并為過量的硼酸液吸收,,再以標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定,就可計(jì)算出樣品中的氮量,。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,,可由其氮量計(jì)算蛋白質(zhì)含量,故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法,。
凱氏定氮儀 產(chǎn)品應(yīng)用及優(yōu)點(diǎn):
DRK-K616全自動(dòng)凱氏定氮儀是根據(jù)凱氏定氮法進(jìn)行氮含量測(cè)定的自動(dòng)智能化分析儀,。它可廣泛應(yīng)用于食品加工、飼料生產(chǎn),、煙草,、畜牧、土肥,、環(huán)境監(jiān)測(cè),、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè),、科研,、教學(xué)、質(zhì)量監(jiān)督等領(lǐng)域做常量,、半微量樣品氮與蛋白質(zhì)的分析,,還可用于銨鹽、揮發(fā)性脂肪酸/堿等的檢測(cè),。用凱氏定氮法測(cè)定試樣時(shí),,需經(jīng)過 消化、蒸餾,、滴定 三個(gè)過程,。蒸餾和滴定是DRK-K616型凱氏定氮儀的主要測(cè)定過程。
DRK-K616型凱氏定氮儀是根據(jù)經(jīng)典凱氏定氮法設(shè)計(jì)的全自動(dòng)蒸餾,,滴定測(cè)氮系統(tǒng),;該儀器給實(shí)驗(yàn)室測(cè)定人員在進(jìn)行測(cè)定氮—蛋白質(zhì)過程中,提供了極大的方便,,且具有使用安全,,可靠;操作簡(jiǎn)單,,省時(shí)等特點(diǎn),。中文對(duì)話界面使用戶操作方便,界面友好,,顯示的信息豐富,,使用戶能夠快速掌握儀器的使用。
根據(jù)凱氏定氮原理測(cè)定,,需要三個(gè)步驟,,即消化、蒸餾,、滴定,。
凱氏定氮 工作原理——消化
將含氮的有機(jī)化合物(蛋白質(zhì))與濃硫酸和催化劑(硫酸銅或凱氏消化片)一同加熱,使蛋白質(zhì)分解,,其中碳和氫被氧化成二氧化碳和水逸出,,而樣品中的有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為氨(NH3)并與硫酸結(jié)合形成硫酸銨。(銨 NH4+)
消化過程:
微火加熱煮沸,,燒瓶?jī)?nèi)物質(zhì)炭化變黑,,產(chǎn)生大量泡沫,泡沫消失后加大火力保持微沸狀態(tài),至液體成藍(lán)綠色澄清狀態(tài)后繼續(xù)加熱 05-1h,,結(jié)束后冷卻,。
(可使用自動(dòng)消解儀完成前處理工作)
凱氏定氮 工作原理——蒸餾
得到的溶液經(jīng)稀釋定容后加入NaOH,蒸餾釋放出NH3,,冷凝之后收集于硼酸溶液中,。
蒸餾過程:
先將消化好的樣品進(jìn)行稀釋,加入NaOH,,經(jīng)過加熱后產(chǎn)生的氨氣進(jìn)入冷凝管,,經(jīng)過冷凝之后流入裝有硼酸溶液的接收瓶中。形成硼酸銨,。
(硼酸溶液中加有混合指示劑,,形成硼酸銨之后吸收液由酸性變?yōu)閴A性,顏色由紫紅轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)綠色,。)
凱氏定氮 工作原理——滴定
用已知濃度的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定,,根據(jù)鹽酸消耗的量來計(jì)算出氮的含量,然后乘以相應(yīng)的換算因子,,即得到蛋白質(zhì)的含量,。
(滴定是指一種定量分析的手段,也是一種化學(xué)實(shí)驗(yàn)操作,。它通過兩種溶液的定量反應(yīng)來確定某種溶質(zhì)的含量,,是根據(jù)指示劑的顏色變化指示滴定終點(diǎn),然后目測(cè)標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗體積,,計(jì)算分析結(jié)果)
滴定過程:
用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴入硼酸銨溶液中,,使溶液的顏色由藍(lán)綠色變?yōu)闇\紅色。