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產(chǎn)品名稱：CryoStor CS10 細(xì)胞DMSO凍存液 GMP臨床級

產(chǎn)品貨號：210102

四種細(xì)胞凍存液

 BioLife Solutions CryoStor CS10  GMP臨床級凍存液

CryoStor CS10細(xì)胞凍存液特點(diǎn)

用于細(xì)胞和組織的高級生物保存液

預(yù)混DMSO

無血清,、無蛋白

USP級高質(zhì)量成分,、cGMP級生產(chǎn)、FDA master文件

滅菌,、內(nèi)毒素和細(xì)胞功能檢測

DMSO無血清GMP臨床級凍存液適用細(xì)胞

多種類型細(xì)胞,，包括如肝細(xì)胞之類的敏感細(xì)胞

BioLife Solutions CryoStor CS10 細(xì)胞DMSO凍存液GMP臨床級生產(chǎn)

MATERIALS ARE MANUFACTURED UNDER cGMP

CryoStor使用說明書

準(zhǔn)備細(xì)胞

1. 待冷凍細(xì)胞配制懸液（機(jī)械法或酶法解離）。

2. 細(xì)胞懸液離心獲得沉淀,。

3. 去除上清液 - 注意：盡可能多地移除培養(yǎng)基,，以降低CryoStor®凍存液被稀釋程度。

細(xì)胞凍存

4. 分離：加入預(yù)冷的（2-8°C）CryoStor®凍存液,。

a. 細(xì)胞密度：0.5-10×10⁶  細(xì)胞/ mL,，常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)方案（細(xì)胞密度可以更高）。

b. CryoStor®凍存液已經(jīng)混合了DMSO,，不需要再添加其他任何凍存劑。

5. 預(yù)冷：細(xì)胞/CryoStor®混合懸液2-8°C孵育約10分鐘,。

6. 成核：-70°C冷凍樣品（許多方案交替使用-70°C和-80°C）

a. 大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞,，使用程序降溫法 (-1°C/min)或類似方法。

b. 程序降溫盒或異丙醇容器需要預(yù)冷到 2-8°C,。

c. 約-5℃時 （-70°C冷凍約15-20min后）啟動樣品內(nèi)的冰核形成（seeding）,，啟動方法可以是程序降溫儀控制的液氮噴放或是機(jī)械攪拌樣本（輕彈或輕拍）,。

d. 使用異丙醇容器的冷凍時間（-70°C）建議為3-4小時。

保存樣本

7.樣本保存

a. 長時保存溫度液氮-130°C以下,。

b.  -80°C 保存建議只能用于短時期保存,，幾周到幾月。

樣本解凍

8. 解凍復(fù)蘇：37°C水浴快速解凍樣本,。

a. 解凍時輕輕搖晃,，直到看不到任何冰塊。1mL凍存管樣本解凍時間大約3分鐘,。

b. 樣本不能在結(jié)冰點(diǎn)以上加熱（0-10°C）,。水浴中拿出來時，凍存管觸感是冷的,。不推薦被動解凍,。

9. 立即用培養(yǎng)基稀釋細(xì)胞/CryoStor®混合物。

a. 稀釋步驟可以一步完成,。

b. 稀釋用培養(yǎng)基溫度為20°C到 37°C,。

c. 推薦稀釋比例≥1:10 （樣本：培養(yǎng)基）

10.合適的條件下培養(yǎng)細(xì)胞。

11. 使細(xì)胞進(jìn)入培養(yǎng)環(huán)境或立即使用細(xì)胞,。

12. 解凍后24h進(jìn)行細(xì)胞活力檢測,。*

注意：細(xì)胞活力檢測應(yīng)該在解凍后24h進(jìn)行，以保證結(jié)果準(zhǔn)確,，并且以非冷凍樣本作為對照,。

*解凍后立即使用細(xì)胞膜完整性指示劑進(jìn)行樣本檢測，如臺盼藍(lán),，分析樣本細(xì)胞產(chǎn)量和活力,，結(jié)果一般會高于正常值。

推薦使用更準(zhǔn)確的活力檢測方法,，活死細(xì)胞熒光分析或代謝分析（MTT or alamarBlue®）,。

同時推薦視覺觀察方法，細(xì)胞貼壁和“漂浮”情況,。

產(chǎn)品名稱：CryoStor CS10 細(xì)胞DMSO凍存液 GMP臨床級

產(chǎn)品貨號：210102

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