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                         陽(yáng)離子聚合物--聚乙烯亞胺（polyethyleminine，PEI)

聚乙烯亞胺是目前研究的陽(yáng)離子聚合物非病毒基因載體,，它是由單體(-CH,CH,-NH-)構(gòu)成的具有伯胺﹑仲胺和叔胺基團(tuán)的水溶性聚合物,。PEI單體中每3個(gè)原子含1個(gè)氮，并構(gòu)成同的胺基,。這些胺基的pKa值不同,，使 PEI在較寬的pH范圍均可以被質(zhì)子化,這是PEI有較強(qiáng)的結(jié)合DNA和黏附細(xì)胞并作為基因轉(zhuǎn)導(dǎo)載體的重要原因。

分子量是決定其轉(zhuǎn)染效率重要因素,，高分子量的PEI具有高效的基因轉(zhuǎn)染效率,，但因?yàn)槠浯罅空姾傻拇嬖谝约胺巧锝到庑裕梢詫?dǎo)致細(xì)胞膜去穩(wěn)定化,，顯示出較大的細(xì)胞毒性,，低分子量的PEI(低于2kDa)毒性低，但基因轉(zhuǎn)染效率也隨之降低,。在HeLa,、COS7、293T和CHO四種細(xì)胞上評(píng)價(jià)交聯(lián)PEI作為基因載體體外轉(zhuǎn)染pGL3的效率,。發(fā)現(xiàn)二硫鍵含量和PEI分子量大小決定了轉(zhuǎn)染效率,。

                                              不同分子量的PEI轉(zhuǎn)染效率不同

枝狀的 800 kD PEI 是*報(bào)道的可用于多種細(xì)胞轉(zhuǎn)染的試劑，枝狀的 25 kD PEI（25B）用于 HEK293 細(xì)胞大規(guī)模瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,，其轉(zhuǎn)染效率較枝狀2 kD,、600 kD、800 kD 或線狀 22 kD PEI（22L）的高,。

有研究報(bào)道,，比較了 3 種商品化的 PEI 轉(zhuǎn)染試劑 25 kD LPEI、40 kDPEI-Max,、PEI pro,，轉(zhuǎn)染 HEK293 和 CHO 細(xì)胞，PEI pro 的轉(zhuǎn)染效率低于 25 kD LPEI,、40 kD PEI-Max,，PEI pro 的毒性。經(jīng)過(guò)優(yōu)化,，PEI-Max 的表達(dá)量?jī)?yōu)于 25 kD LPEI,。

PEI 介導(dǎo)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染中 DNA 和 PEI 比例一般為1:2 ~ 1:3（W/W），提高轉(zhuǎn)染試劑比例會(huì)提高轉(zhuǎn)染效率,，但是隨之細(xì)胞毒性也會(huì)增加,。另外轉(zhuǎn)染時(shí)的細(xì)胞密度,、DNA-PEI聚合物的大小、培養(yǎng)基的組成等都會(huì)影響轉(zhuǎn)染效果,。

                                                  陽(yáng)離子聚合物--脂質(zhì)體 

陽(yáng)離子脂質(zhì)體易穿透細(xì)胞膜,，轉(zhuǎn)染效率要明顯高于其他轉(zhuǎn)染試劑，因而也廣泛用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,，但因其化學(xué)合成不易,，商業(yè)化常用的脂質(zhì)體如 Lipofectamine 價(jià)格較高，遠(yuǎn)貴于其他化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑,，因此只適合于小量瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,。

目前的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染體系是將陽(yáng)離子脂質(zhì)體與 DNA 溶液混合，以形成 DNA 夾在脂質(zhì)雙分子層之間的結(jié)構(gòu),。HEK293 細(xì)胞是非常適合進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,，很容易接收外來(lái) DNA，在合適的轉(zhuǎn)染條件下,，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率可達(dá) 80% 以上,， 使用商品化羅氏的 FuGene HD 或者Invitrogen 的 Lipofectamine2000 的轉(zhuǎn)染效率甚至可達(dá)90% 以上。但是傳統(tǒng)的 CHO 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率相對(duì)較低,，只有 40% ~ 60%,。

Thermo Fisher 公司新開發(fā)的Expi293F 和 ExpiCHO 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的轉(zhuǎn)染效率和表達(dá)量有了較大的提升，但是商品化的轉(zhuǎn)染試劑盒培養(yǎng)基價(jià)格較貴,，不太適用于產(chǎn)業(yè)化放大。

因此,，目前PEI轉(zhuǎn)染試劑,，價(jià)格實(shí)惠深受廣大科研伙伴的熱愛(ài)。重點(diǎn)是超級(jí)便宜?。,。”阋说绞裁闯潭饶?？偷偷告訴你：據(jù)說(shuō)一次可配1L的量,！1L？,？天啊,，怎么能用的完？如此便宜實(shí)惠的轉(zhuǎn)染試劑該如何操作呢,？

                               “免費(fèi)試用PEI轉(zhuǎn)染試劑”活動(dòng)         

活動(dòng)內(nèi)容：客戶可申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑免費(fèi)試用,，單個(gè)研究組僅限申請(qǐng)1 瓶，數(shù)量不多,，先到先得,！

活動(dòng)對(duì)象：所有終端

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