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                         陽離子聚合物--聚乙烯亞胺（polyethyleminine,，PEI)

聚乙烯亞胺是目前研究的陽離子聚合物非病毒基因載體,，它是由單體(-CH,CH,-NH-)構(gòu)成的具有伯胺﹑仲胺和叔胺基團的水溶性聚合物。PEI單體中每3個原子含1個氮,，并構(gòu)成同的胺基,。這些胺基的pKa值不同，使 PEI在較寬的pH范圍均可以被質(zhì)子化,這是PEI有較強的結(jié)合DNA和黏附細(xì)胞并作為基因轉(zhuǎn)導(dǎo)載體的重要原因,。

分子量是決定其轉(zhuǎn)染效率重要因素,，高分子量的PEI具有高效的基因轉(zhuǎn)染效率，但因為其大量正電荷的存在以及非生物降解性,，可以導(dǎo)致細(xì)胞膜去穩(wěn)定化,，顯示出較大的細(xì)胞毒性，低分子量的PEI(低于2kDa)毒性低,，但基因轉(zhuǎn)染效率也隨之降低,。在HeLa、COS7,、293T和CHO四種細(xì)胞上評價交聯(lián)PEI作為基因載體體外轉(zhuǎn)染pGL3的效率,。發(fā)現(xiàn)二硫鍵含量和PEI分子量大小決定了轉(zhuǎn)染效率。

                                              不同分子量的PEI轉(zhuǎn)染效率不同

枝狀的 800 kD PEI 是*報道的可用于多種細(xì)胞轉(zhuǎn)染的試劑,，枝狀的 25 kD PEI（25B）用于 HEK293 細(xì)胞大規(guī)模瞬時轉(zhuǎn)染,，其轉(zhuǎn)染效率較枝狀2 kD、600 kD,、800 kD 或線狀 22 kD PEI（22L）的高,。

有研究報道，比較了 3 種商品化的 PEI 轉(zhuǎn)染試劑 25 kD LPEI,、40 kDPEI-Max,、PEI pro，轉(zhuǎn)染 HEK293 和 CHO 細(xì)胞,，PEI pro 的轉(zhuǎn)染效率低于 25 kD LPEI,、40 kD PEI-Max，PEI pro 的毒性,。經(jīng)過優(yōu)化,，PEI-Max 的表達量優(yōu)于 25 kD LPEI,。

PEI 介導(dǎo)的瞬時轉(zhuǎn)染中 DNA 和 PEI 比例一般為1:2 ~ 1:3（W/W），提高轉(zhuǎn)染試劑比例會提高轉(zhuǎn)染效率,，但是隨之細(xì)胞毒性也會增加,。另外轉(zhuǎn)染時的細(xì)胞密度、DNA-PEI聚合物的大小,、培養(yǎng)基的組成等都會影響轉(zhuǎn)染效果,。

                                                  陽離子聚合物--脂質(zhì)體 

陽離子脂質(zhì)體易穿透細(xì)胞膜，轉(zhuǎn)染效率要明顯高于其他轉(zhuǎn)染試劑,，因而也廣泛用于瞬時轉(zhuǎn)染,，但因其化學(xué)合成不易，商業(yè)化常用的脂質(zhì)體如 Lipofectamine 價格較高,，遠(yuǎn)貴于其他化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑,，因此只適合于小量瞬時轉(zhuǎn)染。

目前的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染體系是將陽離子脂質(zhì)體與 DNA 溶液混合,，以形成 DNA 夾在脂質(zhì)雙分子層之間的結(jié)構(gòu)。HEK293 細(xì)胞是非常適合進行瞬時轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,，很容易接收外來 DNA,，在合適的轉(zhuǎn)染條件下，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率可達 80% 以上,， 使用商品化羅氏的 FuGene HD 或者Invitrogen 的 Lipofectamine2000 的轉(zhuǎn)染效率甚至可達90% 以上,。但是傳統(tǒng)的 CHO 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率相對較低，只有 40% ~ 60%,。

Thermo Fisher 公司新開發(fā)的Expi293F 和 ExpiCHO 瞬時轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的轉(zhuǎn)染效率和表達量有了較大的提升,，但是商品化的轉(zhuǎn)染試劑盒培養(yǎng)基價格較貴，不太適用于產(chǎn)業(yè)化放大,。

因此,，目前PEI轉(zhuǎn)染試劑，價格實惠深受廣大科研伙伴的熱愛,。重點是超級便宜?。?！便宜到什么程度呢,？偷偷告訴你：據(jù)說一次可配1L的量！1L,？,？天啊，怎么能用的完,？如此便宜實惠的轉(zhuǎn)染試劑該如何操作呢,？

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活動內(nèi)容：客戶可申請PEI轉(zhuǎn)染試劑免費試用,，單個研究組僅限申請1 瓶，數(shù)量不多,，先到先得,！

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