高效液相法對茶葉中茶多酚和兒茶素類的含量測定
中國是茶文化的發(fā)源地,,茶葉作為中華傳統(tǒng)文化中的一種飲品原料,在中國有漫長的發(fā)展歷史,。時至今日,,茶湯在全中國仍然有廣泛的受眾群體,很多人在日常生活中以攝入茶湯為主要的水分攝入方式。一直以來,,茶葉憑借其*的活性成分和對癌癥及相關疾病的預防功能,,在降低我國潛在高危群體疾病的產(chǎn)生概率中發(fā)揮作用。
據(jù)研究:茶葉中主要有茶多酚,、生物堿,、脂多糖、氨基酸,、蛋白質(zhì)和礦物質(zhì)成分等,,具有普遍的藥理學活性。茶多酚(tea polyphe- nol,,TP) 是茶葉中 30 多種酚類及其衍生物的總稱,,化學組成包括黃烷醇類、羥類-4-黃烷醇類,、黃酮醇類,、黃酮類、花色苷類,、酚酸類等化合物,。兒茶素,英文名為Catechin,又名兒茶酸,、兒茶精(Caredhieacid),,系從茶葉等天然植物中提取出來的一類酚類活性物質(zhì)。茶葉中含有多種生物堿:茶堿,、可可堿,、大部分茶葉中CAF 是主要生物堿成分。
依據(jù)國家標準GB/T8313-2018《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量檢測方法》對樣品進行前處理和檢測使用外標法定性分析,。
前處理:均勻磨碎的茶葉磨碎試樣于10ml離心管中,,加入在70℃中預熱過的70%甲醇水溶液5ml,用玻璃棒充分攪拌均勻濕潤,,立即移入70℃水浴中,,浸提10min(隔5min攪拌一次),浸提后冷卻至室溫,,轉(zhuǎn)入離心機在3500r/min轉(zhuǎn)速下離心10min,將上清液轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶,。殘渣再用5ml的70%甲醇水溶液提取一次,,重復上述操作。合并提取液定容至10ml,,搖勻,,0.45μm膜過濾,待用,。
標準溶液:沒食子酸儲備液,、兒茶素儲備液,、表兒茶素儲備液、表沒食子兒茶素儲備液,、表沒食子兒茶素沒食子酸酯儲備液,、表兒茶素沒食子酸酯儲備液。
檢測:流動相A:分別將90ml乙腈,,20ml乙酸,,2mlEDTA-2Na溶液加入1000ml容量瓶中,用水定容至刻度,,搖勻,。
流動相B:分別將800ml乙腈,20ml乙酸,,2mlEDTA-2Na溶液加入1000ml容量瓶中,,用水定容至刻度,搖勻,。
色譜條件:C18(粒徑5μm,,250mm×4.6mm),1ml/min流速,,紫外檢測波長為278nm,,柱溫35℃,進樣量10μL,。
梯度條件:0-10min A相100%
10-25min A相:B相(68:32)
參考色譜圖如下:
根據(jù)市場調(diào)研,,北京北方偉業(yè)計量技術(shù)研究院推出茶葉中部分對照品,可用于科研中含量和純度檢測,;定性鑒別研究及中藥的鑒別,、檢查、質(zhì)量控制和校正檢定儀器性能
茶葉中部分對照品列表
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 純度/濃度 | 規(guī)格 |
BWC9015-2016 | 沒食子酸 | ≥98% | 20mg |
BWC9043-2016 | 表沒食子兒茶素 | ≥98% | 20mg |
BWC9041-2016 | 兒茶素 | ≥98% | 20mg |
BWC9042-2016 | 表兒茶素 | ≥98% | 20mg |
BWC9045-2016 | 表沒食子兒茶素沒食子酸酯 | ≥98% | 20mg |
BWC9044-2016 | 表兒茶素沒食子酸酯 | ≥98% | 20mg |