非洲豬瘟檢測PCR實驗室建設@競道了解
非洲豬瘟檢測PCR實驗室建設@競道了解JD-PCR16Construction of PCR Laboratory for detection of African classical swine fever
非洲豬瘟疫情發(fā)生兩年多以來,養(yǎng)殖從業(yè)人員對于非洲豬瘟疫情的認識從最初的漠不關心,,到談非色變,,如今多數(shù)豬場已經(jīng)找到了防控非洲豬瘟的辦法,發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟可防可控,,并不可怕,。目前,,養(yǎng)豬業(yè)通過精準檢測發(fā)現(xiàn)病原,同時有效執(zhí)行生物安全措施使得非洲豬瘟防控取得了可喜的進展,,可有效遏制疫情發(fā)生和蔓延,。
非洲豬瘟在我國暴發(fā)之初,養(yǎng)殖從業(yè)人員對于生物安全管理存在畏難心理,,對非洲豬瘟病毒了解不夠,,普遍認為生物安全太難,無法有效執(zhí)行,。發(fā)生非洲豬瘟后,,精準清除執(zhí)行不到位,以至于幾乎全軍覆沒,,損失慘重,。從今年很多豬場的經(jīng)驗來看,生物安全真正落實到位是可行且行之有效的,。另外,,選擇敏感、穩(wěn)定,、性能優(yōu)異的檢測方法,結合有效的阻斷措施后,,精準清除的成功率非常高,。
非洲豬瘟診斷目前*、使用最多的方法是熒光定量PCR檢測,。熒光定量PCR檢測系統(tǒng)由熒光定量PCR儀,、熒光定量PCR檢測試劑和耗材、核酸提取儀,、核酸提取試劑和耗材等組成,。設備、試劑和耗材選擇和搭配不當,,可能導致檢測結果不準確,。
熒光定量PCR是一種非常敏感的檢測方法。實驗室經(jīng)常開展檢測工作,,一旦實驗室管理和環(huán)境控制沒有執(zhí)行到位,,就存在由于交叉污染出導致假陽性的風險,進而帶來臨床上誤殺豬只的嚴重后果
非洲豬瘟野毒感染時血液和組織中病毒載量非常高,,經(jīng)常檢測到Ct值15左右的樣本,。樣本處理和提取的過程中需要進行離心操作,這些高濃度的樣本離心時容易造成氣溶膠污染,。對于血液和組織樣本,,檢測非洲豬瘟病毒應該盡可能減少離心操作,,這類樣本病毒載量高、樣本較純凈,,可以采用免提取檢測,。
實驗室如果長期檢測陽性樣本,擴增產(chǎn)物中高濃度的目的片段很容易擴散到空氣中并不斷累積導致氣溶膠污染,。
核酸自動提取儀可顯著提高實驗效率,,然而,養(yǎng)殖企業(yè)實驗室大多使用中小型核酸自動提取儀,,并且沒有適當?shù)姆牢廴敬胧?,在樣本處理過程中可能出現(xiàn)交叉污染。相對于氣溶膠污染,,樣本處理過程中交叉污染導致的假陽性概率較小,。
儀器特點
1.體積小,重量輕,,易于攜帶,。輕松滿足外出實驗的需求。
2.內置10寸高清電容屏PDA,,觸屏操作,,簡便快捷。
3.Marlow高品質Peltier制冷片,,結合德國gdPT1000溫度傳感器以及電性電阻加熱補償邊緣的溫度控制模式,,最大升溫速度7℃,最大降溫速度5℃,,大大縮短實驗時間,。
4.整板3s快速采光模式,保證實驗結果孔位一致性,。
5.簡潔直觀的軟件引導,,輕松開啟檢測實驗。
三,、非洲豬瘟PCR檢測儀應用領域
□ 基礎科學研究
□ 病原體檢測
□ 肉制品摻假
□ 轉基因檢測
□ 食品安全檢測
□ 藥物開發(fā)及合理用藥
□ 基因表達
□ 水體監(jiān)測