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非洲豬瘟檢測儀在使用中要注意的幾點(diǎn)
非洲豬瘟檢測儀在使用中要注意的幾點(diǎn)，競道JD-PCR非洲豬瘟PCR檢測儀非洲豬瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)常在單核巨噬細(xì)胞及網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞中復(fù)制,是非洲豬瘟相關(guān)病毒科的成員,。ASFV屬單分子線狀雙鏈DNA病毒,此病毒基因組較大,在170~192kb之間,其基因組包括一個(gè)保守中心和兩端可變區(qū),這些可變區(qū)可編碼5種多基因家族,這與病毒基因組的可變性相關(guān)[1],。根據(jù)p72(B646L)基因末端約500bp核苷酸的差異,已鑒定出24種AS-FV基因型[2],但僅有一個(gè)血清型,血清型根據(jù)血細(xì)胞吸附特性又分為8個(gè)血清群[3]。ASFV引起非洲豬瘟(African swine fever,ASF),常以高病死率,、高熱、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)出血為主要特征[1],。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(Office International des Epizooties,OIE)將ASF列為法定上報(bào)疫病,我國將其列為一類動(dòng)物疫病。ASFV急性和急性型病死率可高達(dá)100%,而在其自然宿主如疣豬(Phacochoerus aethiopicus),、叢林豬(P. porcus)中引起不明顯的持續(xù)性感染[1],。ASFV感染導(dǎo)致的病理學(xué)變化包括皮下出血,、脾臟腫大、淋巴結(jié)出血,、胃腸粘膜及呼吸系統(tǒng)彌散性出血等,與豬瘟(Classical swine fever,CSF),、豬皮炎腎病綜合癥(Porcine dermatitis nephropathy syn-drome,PDNS)[4],、細(xì)菌感染引起的敗血癥尤為相似。因此,通過尸體解剖檢查很難區(qū)分,需依靠實(shí)驗(yàn)室診斷進(jìn)行鑒別,。自2018年8月中國沈陽確診起非洲豬瘟以來,截止到2019年1月14日,我國已有24個(gè)省份發(fā)生80余起疫情,ASF對(duì)我國養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。在2018年有俄羅斯,、羅馬尼亞,、波蘭,、烏克蘭、匈牙利、保加利亞,、比利時(shí),、南非,、贊比亞等22個(gè)國家發(fā)生疫情,可見ASF疫情對(duì)所有養(yǎng)豬業(yè)國家都是一種重大的經(jīng)濟(jì)威脅。由于目前尚無有效的ASF疫苗和治療方法,為了阻止疫情在國內(nèi)蔓延或是波及鄰國養(yǎng)豬業(yè)安全,疾病的控制主要依靠撲殺感染動(dòng)物,、嚴(yán)格的衛(wèi)生措施和快速的診斷技術(shù)。筆者將ASF的診斷技術(shù)歸納為兩類:類是病原學(xué)檢測;第二類是血清學(xué)檢測,。本文總結(jié)了OIE推薦的ASFV檢測技術(shù)以及現(xiàn)場使用高效,、快速,、的檢測方法,旨在為現(xiàn)場診斷提供理論基礎(chǔ),快速排查本病,為后續(xù)進(jìn)一步采取措施爭奪更多寶貴時(shí)間。
一,、儀器用途競道JD-PCR非洲豬瘟檢測儀
非洲豬瘟病毒檢測是非洲豬瘟防控工作的重要舉措，意義重大,。為進(jìn)一步提高非洲豬瘟病毒檢測結(jié)果準(zhǔn)確性,，規(guī)范非洲豬瘟病毒診斷制品生產(chǎn),、經(jīng)營和使用行為，2021年1月1日起,，各有關(guān)門和單位在動(dòng)物檢疫或疫病監(jiān)測,、診斷中,，對(duì)生豬及其產(chǎn)品開展非洲豬瘟病毒檢測，應(yīng)當(dāng)使用已取得農(nóng)業(yè)農(nóng)村核發(fā)的產(chǎn)品批準(zhǔn)文號(hào)的非洲豬瘟病毒診斷制品,，確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確。
競道非洲豬瘟PCR檢測儀(實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀支持變溫檢測)用于運(yùn)行病毒檢測實(shí)驗(yàn),，并對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析;儀器既可在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)操作,，又可用于野外科學(xué)實(shí)驗(yàn),，配合相應(yīng)試劑，對(duì)取自待檢測樣本的分析物或其他分析物中的目標(biāo)核酸進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的定性檢測,。
競道非洲豬瘟檢測儀配套非洲豬瘟病毒熒光pcr檢測試劑盒,、非洲豬瘟病毒熒光pcr核酸檢測試劑盒均已經(jīng)獲得農(nóng)業(yè)農(nóng)村產(chǎn)品批準(zhǔn),，可以滿足非洲豬瘟核酸現(xiàn)場快速檢測需求?？啥靠焖傩竽令惣膊≡\斷如非洲豬瘟,、禽流感,、豬瘟、豬藍(lán)耳,、偽狂犬等疾病,，廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖場,、屠宰場、食品加工廠,、肉產(chǎn)品深加工企業(yè),、農(nóng)業(yè)農(nóng)村,、畜牧、檢驗(yàn)檢疫單位使用,。
實(shí)驗(yàn)員需要經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室技術(shù)和儀器,、軟件操作的專門培訓(xùn),，具備熟練的相關(guān)操作技能。
二,、儀器特點(diǎn)
1.體積小,，重量輕，易于攜帶,。輕松滿足外出實(shí)驗(yàn)的需求,。
2.內(nèi)置10寸高清電容屏PDA，觸屏操作,，簡便快捷,。
3.Marlow高品質(zhì)Peltier制冷片,，結(jié)合德國PT1000溫度傳感器以及電性電阻加熱補(bǔ)償邊緣的溫度控制模式，大升溫速度7℃,，大降溫速度5℃,，大大縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
4.整板3s快速采光模式,，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果孔位一致性,。
5.簡潔直觀的軟件引導(dǎo)，輕松開啟檢測實(shí)驗(yàn),。
三,、非洲豬瘟PCR檢測儀應(yīng)用領(lǐng)域
□ 基礎(chǔ)科學(xué)研究
□ 病原體檢測
□ 肉制品摻假
□ 轉(zhuǎn)基因檢測
□ 食品安全檢測
□ 藥物開發(fā)及合理用藥
□ 基因表達(dá)
□ 水體監(jiān)測
四、技術(shù)參數(shù)
樣品容量：16x0.2ml,、支持8聯(lián)管
適用耗材：常見透明PCR 耗材,，8x0.2ml 排管，0.2ml 單管
反應(yīng)體系：5-120ul反應(yīng)模式體系
加熱/制冷模塊：進(jìn)口半導(dǎo)體熱電模塊
溫度控制范圍：4°C-99℃
升降溫平均速率≥2°C/秒
溫控精度：≤±0.1°C
溫度均勻性：≤± 0.2°C
溫控區(qū)域數(shù)量：多點(diǎn)(2 點(diǎn))
梯度數(shù)：0 個(gè)
梯度溫度范圍：無
梯度孔數(shù)：無
激發(fā)光源：免維護(hù)led
激發(fā)光波長范圍：400-700nm
檢測件：進(jìn)口光電檢測器
檢測通道數(shù)：標(biāo)配 1通道(FAM),、高配(選配)(FAM,、VIC)
適用染料和探針：FAM/SYBR Green I, VIC/HEX/CY3(選配), ROX/Texas Red(選配), Cy5,TAMARA(選配)
軟件功能：熒光定量 PCR 系統(tǒng)軟件;