細(xì)胞名稱：HCT116/L細(xì)胞

種屬：人

組織來源：結(jié)腸癌

生長特性：貼壁生長

形態(tài)特征：上皮細(xì)胞

微生物及支原體檢測(cè)：陰性  

安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操 作,，并請(qǐng)注意防護(hù),，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。 

培養(yǎng)條件：

wan全培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%胎牛血清+2000ng/ml L

血清我們推薦用:  WinSera® 特級(jí)胎牛血清 FBS500-WP-002

培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%

傳代方法：

收到細(xì)胞后,，在倒置鏡下(最好是在 4X 物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況,。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),，嚴(yán)格無菌操作,，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液,，換 10ml 新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng),。

(二)如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液,，用 PBS（不含鈣,鎂離子）洗 1-2 次,。

2. 加 0.7-1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，用力拍打瓶壁,，期間每隔 5-10s 放到顯微鏡下觀察,，直至 50-70%的細(xì)胞脫落后，加入 2ml 以上wan全培養(yǎng)基中消化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加wan全培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中,。如果沒有特別說明,，收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是一傳二。

注：1,、觀察細(xì)胞最好在低倍鏡（4 或 5X 物鏡)下進(jìn)行,，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?/span> 10X 或 20X 物鏡下,。

2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基,，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素,。

3、有些細(xì)胞貼壁不牢,，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi),。

4,、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細(xì)胞有污染,，請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系。..

凍存方法：

凍存液：90%胎牛血清,，10%DMSO

儲(chǔ)存：液氮儲(chǔ)存

特別提醒：就換液,，運(yùn)輸液不能用細(xì)胞到了后，先靜置3-5h,后觀察細(xì)胞狀態(tài),，狀態(tài)好,，細(xì)胞量達(dá)到80%就可以傳代，沒有就換液,，運(yùn)輸液不能用,！

傳代方法：加入 pbs 清洗 1-2 次，加入 0.7-1ml yi酶,，用力拍打瓶壁,，間隔 5-10s放到顯微鏡下觀察,，50%的細(xì)胞脫落后，加入 2ml 以上wan全培養(yǎng)基中止消化,，然后分瓶,。

【加入消化液后一定不要放到培養(yǎng)箱、計(jì)算時(shí)間,，一定要用力拍打瓶壁】

這個(gè)細(xì)胞就是很易消化,，很容易消化過的，只要消化好了,，不會(huì)有問題的,！

HCT116/L細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室相關(guān)血清產(chǎn)品：

序號(hào) 中文名 英文名稱 貨號(hào)

1 WinSera® 優(yōu)級(jí)胎牛血清 Fetal Bovine Serum FBS500-WS-002

2 WinSera® 特級(jí)胎牛血清 Fetal Bovine Serum FBS500-WP-002

3 WinSera®干細(xì)胞專用胎牛血清  Stem cells Qualified FBS500-WE-002(ES)

4 WinSera® 無外泌體血清  Exosome-depleted FBS FBS050-EXO

5 WinSera® AB血清 Human Serum AB HU050-S-011

6 WinSera®熱滅活胎牛血清  Fetal Bovine Serum, Heat-Inactivated FBS500-WH-002

7 WinSera®碳吸附胎牛血清 Charcoal Stripped  FBS FBS500-WCS-002

8 WinSera®透析胎牛血清  Fetal Bovine Serum, Dialyzed FBS500-WD-002

9 WinSera®超低IGg胎牛血清  Low IgG FBS FBS500-WLG-002

10 WinSera®新生牛血清 Newborn Calf Serum NCS500-W-002