COLO320細胞，人結直腸腺癌細胞

生長狀態(tài)：貼壁生長

蘇州千舍生物,，細胞培養(yǎng)試劑，常備國內外常見品牌血清/胎牛血清,，擁有完善的細胞庫管理體系,，供應上萬種類細胞株細胞系，公司細胞技術60%為碩士和博士學歷,，其中明星產品有：DC2.4細胞,、RAW264.7細胞、COV434細胞,、HO-8910細胞,、A2780細胞、SK-OV-3細胞,、OVCAR-3細胞,、OVCA433細胞、HEK-293-6e細胞,、FRO細胞,、HEPG2.2.15細胞、HL-7702細胞、L-02細胞,、M-ICC12細胞,、143B細胞、HOS細胞,、M4e細胞,、M2e細胞、TU686細胞,、TU212細胞,、vero細胞、SW48細胞,、SW480細胞,、NCCIT細胞、B16-F10細胞,、HK-1細胞,、Hep2細胞、C666-1細胞,、HNE1細胞,、HNE1/DDP細胞、capan-1細胞,、vero e6細胞,、A375細胞、Hs294T細胞,、HSC-LX-2細胞,、LOVO細胞、MKN-28細胞,、RL952細胞,、Hela細胞、A549細胞,、Ishikawa細胞,、EBC-1細胞、H1993細胞,、H1993細胞,、Hep-2細胞、NCI-H441細胞,、LS174T細胞,、NCCIT細胞,、capan-1細胞,、Hep3B細胞,、HUVEC細胞、SW116細胞等。

  我公司以客戶為核心,，以產品質量求生存,，以售后服務求信譽。我們通過不斷改進來提高效率,，絕不以犧牲品質作為代價,。“誠信、創(chuàng)新,、嚴謹,、專業(yè)”愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作，共創(chuàng)輝煌,！

COLO320細胞,，人結直腸腺癌細胞幾種常用細胞培養(yǎng)基產品

⒈ BME(basal medium eagle)基礎培養(yǎng)基

⒉ MEM

⒊ DMEM

⒋ IMDM

⒌ RPMI-1640

⒍ M199

⒎ Mccoy's 5A

⒏ F10 F12 DMEM混合F12(三)幾種常用細胞培養(yǎng)配套試劑的配置(緩沖液、平衡鹽溶液等)

五,、細胞傳代培養(yǎng)（消化法）

具體操作：

（一）傳代前準備

1.預熱培養(yǎng)用液：把已經配制好的裝有培養(yǎng)液,、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。

2.用75％酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手,。

3.正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間,，不僅便于操作而且可減少污染。

4.點燃酒精燈：注意火焰不能太小,。

5.準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶,，放入微波爐內高火，8分鐘再次消毒,。,？？,？

6.取出預熱好的培養(yǎng)用液：取出已經預熱好的培養(yǎng)用液,，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。

7.從培養(yǎng)箱內取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋,，用酒精棉球擦拭

顯微鏡

的臺面，再在鏡下觀察細胞,。

8.打開瓶口：將各瓶口一一打開,，同時要在酒精燈上燒口消毒。

（二）胰蛋白酶消化

1.加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液,，用PBS清洗（沖洗）,，加入適量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以蓋住細胞*,，*消化溫度是37℃,。

2.顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質回縮，細胞之間不再連接成片,，表明此時細胞消化適度,。

3.吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管,，加入新鮮的培養(yǎng)液,。

（三）吹打分散細胞

1.吹打制懸：用滴管將已經消化細胞吹打成細胞懸液。

2.吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入10ml離心管中,。

3.平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中,，以1000轉/分鐘離心6-8分鐘。

4.棄上清液,，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液,，加入2ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液,。

（四）分裝稀釋細胞

1.分裝：將細胞懸液吸出分裝至2-3個培養(yǎng)瓶中,，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋。

2.顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量,，必要是計數,。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于5×105/ml,。最后要做好標記,。

（五）繼續(xù)培養(yǎng)

用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋,，放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),。傳代細胞2小時后開始貼附在瓶壁上。當生長細胞鋪展面積占培養(yǎng)瓶底面積25％時為一個＋,，占50％為＋＋,，占75％時為＋＋＋。

傳代細胞培養(yǎng)注意事項：

1.嚴格的無菌操作

2.適度消化：消化的時間受消化液的種類,、配制時間,、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化,，一旦胞質回縮,，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化,。

附：EDTA（0.02％乙二胺四乙酸二鈉）消化液配方：EDTA 0.20g,，NaCl 8.00g， KCl 0.20g,， KH2PO4 0.02g,， 葡萄糖 2.00g,，0.5％酚紅4ml，加入蒸餾水定容至1000ml,。10磅20min高壓滅菌,，使用時調節(jié)PH值到7.4。注意EDTA不能被血清中和,，使用后培養(yǎng)瓶要*清洗,，否則再培養(yǎng)時細胞容易脫壁。

六,、細胞的復蘇

細胞復蘇的原則--快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,，對細胞造成損害,。

人乳腺癌細胞+LUC細胞，MCF-7+Luc人結直腸腺癌細胞 COLO320

人結直腸腺癌細胞 COLO320 DM

人結直腸腺癌細胞 COLO320 HSR

人結腸癌細胞 CW-2

結腸癌細胞 cx-1

人巨核細胞白血病細胞 DAMI

人Burkitt's淋巴瘤細胞 DAUDI

人結直腸腺癌細胞 DLD-1

人前列腺癌細胞 DU145

人臍靜脈細胞融合細胞 EA.hy926

人食管癌細胞 Eca-109

人膀胱癌細胞 ECV-304

人膀胱癌細胞 EJ-1[EJ1]

人卵巢透明細胞癌細胞 ES-2

人腺癌細胞系 F56

人咽鱗癌細胞 FADu

人肝癌細胞亞型（過表達谷氨酰氨合成酶） GS-HEPG2

人T淋巴瘤白血病細胞 H9/HTLV-IIIB

人胚胎干細胞H9 h9 Feeder Frec

人永生化表皮細胞 hacat

人整合SV40基因的乳腺上皮細胞 HBL-100

人非小細胞肺癌細胞 HCC827

人子宮鱗癌細胞(高分化) HCC-94

人膽管細胞型肝癌細胞 hccc-9810

人高轉移肝癌細胞 HCC-LM3

永生化人腦微血管內皮細胞 HCMEC/D3

人結腸癌細胞 HCT116

人結腸癌細胞 hct-15

人結直腸癌氟尿嘧啶耐藥株 HCT15/Fu

人結直腸癌紫杉醇耐藥株 HCT-15/Taxol

人結直腸癌癌細胞 HCT-8

人子宮內膜腺癌細胞 HEC-1-A

人子宮膜腺癌細胞 HEC-1-B

人胚腎細胞 HEK-293（293）

人胚腎細胞 HEK-293A

人紅白細胞白血病細胞 HEL

人子g頸癌細胞 HELA

人g頸癌細胞 chang liver

人g頸癌細胞 HeLa.S3

人肝癌細胞 hepg2.2.15

人肝癌細胞 Hep3B2.1-7 [Hep3B]

人肝癌細胞 HEPG2

人肝癌細胞人肝癌(HBV) HEPG2.2.15