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Hyclone雙抗SV30010|暑期特惠
產(chǎn)品名稱:雙抗
品牌:Hyclone
貨號:SV30010
規(guī)格:100ml
備注:-20度
蘇州千舍批發(fā)供應hyclone液體培養(yǎng)基,,Gibco胎牛血清,,無外泌體血清,Gibco液體培養(yǎng)基,,hyclone雙抗,,Gibco胰酶,SERANA胎牛血清
GIBCO雙抗 15140-122 100ml
GIBCO胰酶 25200-056 100ml
GIBCO胰酶25200-072 500ml
Hyclone 雙抗 SV30010 100ml
Hyclone 胰酶 SH30042.01 100ml
暑期大促,,除25200-072外,,以上雙抗胰酶
滿十送一,滿十送一
研究者一般需要考慮兩種細胞培養(yǎng)污染:微生物細胞培養(yǎng)污染和其他細胞系的混入,。 兩種污染都非常普遍,,必須重視可能的污染以及污染對結果造成的影響,。 應根據(jù)各個研究者的需求和經(jīng)驗來決定是否使用抗生素和抗真菌劑來防止污染。
我們生產(chǎn)了種類繁多的抗生素和抗真菌劑來控制細菌,、真菌,、支原體和酵母所造成的污染。 研究者嘗試使用抗生素或抗真菌劑來消除或控制污染時,,必須要清楚對于特定的細胞系這些物質可能是具有毒性的,。 使用前,首先進行劑量反應試以確定于何種劑量等級即開始產(chǎn)生細胞毒性非常重要,。
雙抗就是青鏈霉素混合液(100x) ,,是專門用于細胞培養(yǎng)的,可以直接添加到細胞培養(yǎng)液內,。
雙抗起的作用:抗生素,,抑制細菌生長;避免細胞污染,。
加不加雙抗不是的,,視實際情況而定。
如果你實驗室條件足夠好,,如果你操作足夠規(guī)范,,就盡量不要加雙抗了。相反,,如果你實驗條件不夠,,操作也沒有把握,還是加的好,。好的方法是做個實驗對照,,看有沒有必要加雙抗。
在細胞培養(yǎng)液中推薦的青霉素的工作濃度為100u/ml,,鏈霉素的工作濃度為0.1mg/ml,。
如果加多了話對細胞毒性太大,細胞生長艱難,。加入雙抗時,,一般先加在培養(yǎng)基里,因為如果是直接在換液傳代滴加的話,,那個雙抗的濃度實在不好控制,。
誤區(qū):長期使用抗生素,以對抗污染,。
細胞培養(yǎng)時不應常規(guī)使用抗生素,。連續(xù)使用抗生素會促進抗生素耐藥性細胞株的產(chǎn)生,導致輕度污染持續(xù)存在,,一旦將抗生素從培養(yǎng)基中去除,,這種輕度污染終將發(fā)展成大規(guī)模污染。
連續(xù)使用抗生素會掩蓋支原體感染及其他隱性污染,,有些抗生素會與細胞發(fā)生交叉反應,,干擾你研究的細胞過程。
雙抗通常情況下在-20℃保存一年,。由于該試劑在4℃下長期存放是不穩(wěn)定的,,應分裝后在-20℃下避光保存。青霉素在2-8的℃存放時間不應超過4天,,鏈霉素相對穩(wěn)定一點,,在2-8℃可以存放30天左右。切記,,雙抗從凍融后里面的基本成分已開始降解,。
Hyclone雙抗SV30010|暑期特惠購買蘇州千舍細胞注意事項:
一、客戶收到細胞先不開蓋,,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,,顯微鏡下拍細胞100X,,200X各一張),排除細胞本身污染的情況,;
收到細胞未開封,,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
二,、如為貼壁細胞,,請在顯微鏡下觀察細胞密度:
1. 未超過80%匯合度時,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,,嚴格無菌操作;然后打開蓋子,,先把培養(yǎng)基吸出10ml左右,,放在離心管里,然后瓶口過火(嚴禁直接傾倒),,這樣可以保證不污染,,再用10ml的移液管,將剩余的培液全部吸出,,放于離心管中,,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細胞生長情況調整)之后,傳代或者凍存,。
2. 超過80%匯合度時,,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1) 棄去培養(yǎng)液,,用3ml PBS(不含鈣,,鎂離子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,,倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓分散,,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來,;
3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,,按要求分瓶,。
三、如為懸浮細胞,,吸出培養(yǎng)液,,1000轉/分鐘離心5分鐘,吸出上清,,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶,。
注意:換液時一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,,以免細胞不適應而造成生長不好,。
四、細胞出現(xiàn)問題,,可重發(fā)的情況有哪些,?判定標準是什么?
?。?)細胞運輸途中遭遇的各種問題,,細胞丟失、破損,、漏液等,,重發(fā);
?。?)凍存的細胞復蘇后,,絕大多數(shù)細胞未存活,,重發(fā);
?。?)存活的細胞靜置24小時后,,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā),;
?。?)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,,出現(xiàn)污染,,重發(fā);
?。?)視具體情況而定,。
五、細胞出現(xiàn)問題,,不予以重發(fā)的情況有哪些,?
(1)客戶造成細胞污染,不重發(fā),;
?。?)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā),;
?。?)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,,不重發(fā),;
(4)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,,不重發(fā),;
(5)細胞收到2天內,,未告知,,不重發(fā);
?。?)視具體情況而定,。
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Gibco 雙抗溶液 貨號:15140-122
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★Hyclone各款血清:30084.03澳洲,、30087.02南美、sv30087.03烏拉圭
★小牛血清,,BI胎牛血清(04-001-1ACS,、04-002-1A、04-400-1A)
★SIGMA血清(F2442),,PAN(ST30-3302,、ST30-2602)
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★Gibco培養(yǎng)基:C11995500BT(DMEM高糖)、C10010500BT(PBS),、C11875500BT(1640)
★Hyclone培養(yǎng)基:SH30021.01,、SH300243.01、SH30265.01,、SH30256.01
★公司常備現(xiàn)貨:lipo2000(0.75ml)11668-027,、(1.5ml)11668-019
lipo3000(0.75ml)L3000-008、(1.5ml)L3000-015
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trizol(100ml)15596-026,、(200ml)15596-018
trizol LS(100ml)10296010、(200ml)10296028
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