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Hyclone胰酶SH30042.01|暑期特惠
產(chǎn)品名稱:胰酶
品牌:Hyclone
貨號:SH30042.01
規(guī)格:100ml
備注:-20度
蘇州千舍批發(fā)供應hyclone液體培養(yǎng)基,,Gibco胎牛血清,,無外泌體血清,Gibco液體培養(yǎng)基,hyclone雙抗,,Gibco胰酶,,SERANA胎牛血清
GIBCO雙抗 15140-122 100ml
GIBCO胰酶 25200-056 100ml
GIBCO胰酶25200-072 500ml
Hyclone 雙抗 SV30010 100ml
Hyclone 胰酶 SH30042.01 100ml
暑期大促,除25200-072外,,以上雙抗胰酶
滿十送一,,滿十送一
研究者一般需要考慮兩種細胞培養(yǎng)污染:微生物細胞培養(yǎng)污染和其他細胞系的混入。 兩種污染都非常普遍,,必須重視可能的污染以及污染對結果造成的影響,。 應根據(jù)各個研究者的需求和經(jīng)驗來決定是否使用抗生素和抗真菌劑來防止污染。
我們生產(chǎn)了種類繁多的抗生素和抗真菌劑來控制細菌,、真菌,、支原體和酵母所造成的污染。 研究者嘗試使用抗生素或抗真菌劑來消除或控制污染時,,必須要清楚對于特定的細胞系這些物質(zhì)可能是具有毒性的,。 使用前,首先進行劑量反應胰酶是一種蛋白酶,。通過在特定位置上降解蛋白,,使細胞間結合處蛋白降解,這時細胞由于自身內(nèi)部細胞骨架的張力作用下成為球形,,從而使細胞分開,。
不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度,、溫度和作用時間有關,,在pH為8.0、溫度為37℃時,,胰酶溶液的作用能力強,。使用胰酶時,應把握好濃度,、溫度和時間,,以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+,、Mg2+和血清,、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時應選用不含Ca2+,、Mg2+的BSS,,如:D-Hanks液。終止消化時,,可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用,。
胰酶本身就是消化蛋白的,,而細胞膜又富含各種膜蛋白,,消化過頭會對細胞造成損傷的,。
雙抗通常情況下在-20℃保存一年。由于該試劑在4℃下長期存放是不穩(wěn)定的,,應分裝后在-20℃下避光保存,。青霉素在2-8的℃存放時間不應超過4天,鏈霉素相對穩(wěn)定一點,,在2-8℃可以存放30天左右,。切記,雙抗從凍融后里面的基本成分已開始降解,。
Hyclone胰酶SH30042.01|暑期特惠購買蘇州千舍細胞注意事項:
一,、客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,,200X各一張),,排除細胞本身污染的情況;
收到細胞未開封,,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞,。
二、如為貼壁細胞,,請在顯微鏡下觀察細胞密度:
1. 未超過80%匯合度時,,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),,嚴格無菌操作,;然后打開蓋子,先把培養(yǎng)基吸出10ml左右,,放在離心管里,,然后瓶口過火(嚴禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,,再用10ml的移液管,,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了,。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細胞生長情況調(diào)整)之后,傳代或者凍存,。
2. 超過80%匯合度時,,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1) 棄去培養(yǎng)液,用3ml PBS(不含鈣,,鎂離子)洗1-2次,;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后,,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,,細胞隨即脫落下來;
3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,,吸出,,分到新的培養(yǎng)瓶中,按要求分瓶,。
三,、如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,,1000轉/分鐘離心5分鐘,,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶,。
注意:換液時一半用我們的培養(yǎng)基,,一半用你們的,以免細胞不適應而造成生長不好,。
四,、細胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些,?判定標準是什么,?
(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,,細胞丟失,、破損、漏液等,,重發(fā),;
(2)凍存的細胞復蘇后,,絕大多數(shù)細胞未存活,,重發(fā);
?。?)存活的細胞靜置24小時后,,絕大多數(shù)細胞未存活,,重發(fā);
?。?)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,,出現(xiàn)污染,重發(fā),;
?。?)視具體情況而定。
五,、細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些,?
(1)客戶造成細胞污染,,不重發(fā);
?。?)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,,不重發(fā);
?。?)細胞狀態(tài)不好,,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā),;
?。?)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā),;
?。?)細胞收到2天內(nèi),未告知,,不重發(fā),;
(6)視具體情況而定,。
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Gibco液體培養(yǎng)基,, MEM液體培養(yǎng)基,,貨號:C11095500BT
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Gibco液體培養(yǎng)基,,DMEM低糖培養(yǎng)基 貨號: C11885500BT
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脂質(zhì)體2000 原裝 GIBCO 11668-019原裝 1.5m *
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★SIGMA試劑現(xiàn)貨3-5天
★Gibco各款血清:10099-141澳洲、16000-044北美,、10270-106南美,,10437-028墨西哥,10091-148新西蘭胎牛血清
★Hyclone各款血清:30084.03澳洲,、30087.02南美,、sv30087.03烏拉圭
★小牛血清,BI胎牛血清(04-001-1ACS,、04-002-1A,、04-400-1A)
★SIGMA血清(F2442),PAN(ST30-3302,、ST30-2602)
★德國SERANA血清中國代理
★Gibco培養(yǎng)基:C11995500BT(DMEM高糖),、C10010500BT(PBS)、C11875500BT(1640)
★Hyclone培養(yǎng)基:SH30021.01,、SH300243.01,、SH30265.01、SH30256.01
★公司常備現(xiàn)貨:lipo2000(0.75ml)11668-027,、(1.5ml)11668-019
lipo3000(0.75ml)L3000-008,、(1.5ml)L3000-015
RNAiMax(0.75ml)13778-075、(1.5ml)13778-150
trizol(100ml)15596-026,、(200ml)15596-018
trizol LS(100ml)10296010,、(200ml)10296028
B27 (10ML) 17504-044 胰酶(100ml)25200-056
雙抗(100ml)15140-122 西班牙瓊脂糖(100g)
羅氏潮霉素B 1g/20ml MERCK蛋白酶K(100g)
DMSO-二甲基亞砜(100ml)D2650 日本同仁cck8試劑盒
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