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Gibco胰酶25200-056|暑期特惠
產(chǎn)品名稱:胰酶
品牌:Gibco
貨號(hào):25200-056
規(guī)格:100ml
備注:-20度
蘇州千舍批發(fā)供應(yīng)hyclone液體培養(yǎng)基,,Gibco胎牛血清,,無(wú)外泌體血清,Gibco液體培養(yǎng)基,,hyclone雙抗,,Gibco胰酶,SERANA胎牛血清
GIBCO雙抗 15140-122 100ml
GIBCO胰酶 25200-056 100ml
GIBCO胰酶25200-072 500ml
Hyclone 雙抗 SV30010 100ml
Hyclone 胰酶 SH30042.01 100ml
暑期大促,,除25200-072外,,以上雙抗胰酶
滿十送一,滿十送一
研究者一般需要考慮兩種細(xì)胞培養(yǎng)污染:微生物細(xì)胞培養(yǎng)污染和其他細(xì)胞系的混入,。 兩種污染都非常普遍,,必須重視可能的污染以及污染對(duì)結(jié)果造成的影響。 應(yīng)根據(jù)各個(gè)研究者的需求和經(jīng)驗(yàn)來(lái)決定是否使用抗生素和抗真菌劑來(lái)防止污染,。
我們生產(chǎn)了種類(lèi)繁多的抗生素和抗真菌劑來(lái)控制細(xì)菌,、真菌、支原體和酵母所造成的污染,。 研究者嘗試使用抗生素或抗真菌劑來(lái)消除或控制污染時(shí),,必須要清楚對(duì)于特定的細(xì)胞系這些物質(zhì)可能是具有毒性的。 使用前,,首先進(jìn)行劑量反應(yīng)胰酶是一種蛋白酶,。通過(guò)在特定位置上降解蛋白,使細(xì)胞間結(jié)合處蛋白降解,,這時(shí)細(xì)胞由于自身內(nèi)部細(xì)胞骨架的張力作用下成為球形,,從而使細(xì)胞分開(kāi)。
不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣,。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度,、溫度和作用時(shí)間有關(guān),,在pH為8.0,、溫度為37℃時(shí),胰酶溶液的作用能力強(qiáng)。使用胰酶時(shí),,應(yīng)把握好濃度,、溫度和時(shí)間,以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷,。因Ca2+,、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性,,所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+,、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液,。終止消化時(shí),,可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
胰酶本身就是消化蛋白的,,而細(xì)胞膜又富含各種膜蛋白,,消化過(guò)頭會(huì)對(duì)細(xì)胞造成損傷的。
雙抗通常情況下在-20℃保存一年,。由于該試劑在4℃下長(zhǎng)期存放是不穩(wěn)定的,,應(yīng)分裝后在-20℃下避光保存。青霉素在2-8的℃存放時(shí)間不應(yīng)超過(guò)4天,,鏈霉素相對(duì)穩(wěn)定一點(diǎn),,在2-8℃可以存放30天左右。切記,,雙抗從凍融后里面的基本成分已開(kāi)始降解,。
Gibco胰酶25200-056|暑期特惠購(gòu)買(mǎi)蘇州千舍細(xì)胞注意事項(xiàng):
一、客戶收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋,,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況,;
收到細(xì)胞未開(kāi)封,,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
二,、如為貼壁細(xì)胞,,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度:
1. 未超過(guò)80%匯合度時(shí),用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,,噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),,嚴(yán)格無(wú)菌操作,;然后打開(kāi)蓋子,先把培養(yǎng)基吸出10ml左右,,放在離心管里,,然后瓶口過(guò)火(嚴(yán)禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,,再用10ml的移液管,,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了,。培養(yǎng)16hr(時(shí)間根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況調(diào)整)之后,傳代或者凍存,。
2. 超過(guò)80%匯合度時(shí),,請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1) 棄去培養(yǎng)液,,用3ml PBS(不含鈣,,鎂離子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓分散,,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來(lái),;
3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,,按要求分瓶,。
三、如為懸浮細(xì)胞,,吸出培養(yǎng)液,,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,吸出上清,,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶,。
注意:換液時(shí)一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好,。
四、細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,,可重發(fā)的情況有哪些,?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么,?
(1)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,,細(xì)胞丟失、破損,、漏液等,,重發(fā);
?。?)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā),;
?。?)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,,重發(fā),;
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封,,出現(xiàn)污染,,重發(fā);
?。?)視具體情況而定,。
五、細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,,不予以重發(fā)的情況有哪些,?
(1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā),;
?。?)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā),;
?。?)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,,不重發(fā),;
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,,不重發(fā),;
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),,未告知,,不重發(fā),;
(6)視具體情況而定,。
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Gibco液體培養(yǎng)基,, MEM液體培養(yǎng)基,,貨號(hào):C11095500BT
Gibco液體培養(yǎng)基, MEM液體培養(yǎng)基,,貨號(hào):C11095500BT
Gibco液體培養(yǎng)基,,DMEM低糖培養(yǎng)基 貨號(hào): C11885500BT
Gibco液體培養(yǎng)基,DMEM高糖培養(yǎng)基 貨號(hào): C11995500BT
Gibco液體培養(yǎng)基,,1640培養(yǎng)基 貨號(hào):C11875500BT
Gibco液體培養(yǎng)基,,DMEM/F12(1:1)培養(yǎng)基 貨號(hào):C11330500BT
Gibco緩沖液 PBS7.4 貨號(hào):C10010500BT
Gibco 胰酶溶液 貨號(hào):25200-056 100ML
Gibco 胰酶溶液 貨號(hào):25200-072 500ML
Gibco 雙抗溶液 貨號(hào):15140-122
SBI無(wú)外泌體胎牛血清 ,原裝行貨,,重磅襲來(lái),,低價(jià)銷(xiāo)售,熱爆*
脂質(zhì)體2000 原裝 GIBCO 11668-027原裝 0.75ml *
脂質(zhì)體2000 原裝 GIBCO 11668-019原裝 1.5m *
脂質(zhì)體3000 原裝GIBCO L3000-015 原裝1.5ML *
★SIGMA試劑現(xiàn)貨3-5天
★Gibco各款血清:10099-141澳洲,、16000-044北美,、10270-106南美,10437-028墨西哥,,10091-148新西蘭胎牛血清
★Hyclone各款血清:30084.03澳洲,、30087.02南美、sv30087.03烏拉圭
★小牛血清,,BI胎牛血清(04-001-1ACS,、04-002-1A、04-400-1A)
★SIGMA血清(F2442),,PAN(ST30-3302,、ST30-2602)
★德國(guó)SERANA血清中國(guó)代理
★Gibco培養(yǎng)基:C11995500BT(DMEM高糖)、C10010500BT(PBS),、C11875500BT(1640)
★Hyclone培養(yǎng)基:SH30021.01,、SH300243.01、SH30265.01,、SH30256.01
★公司常備現(xiàn)貨:lipo2000(0.75ml)11668-027,、(1.5ml)11668-019
lipo3000(0.75ml)L3000-008、(1.5ml)L3000-015
RNAiMax(0.75ml)13778-075,、(1.5ml)13778-150
trizol(100ml)15596-026,、(200ml)15596-018
trizol LS(100ml)10296010、(200ml)10296028
B27 (10ML) 17504-044 胰酶(100ml)25200-056
雙抗(100ml)15140-122 西班牙瓊脂糖(100g)
羅氏潮霉素B 1g/20ml MERCK蛋白酶K(100g)
DMSO-二甲基亞砜(100ml)D2650 日本同仁cck8試劑盒
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