Gibco 1640培養(yǎng)基（C11875500BT）

 產品名稱：1640培養(yǎng)基

貨號：C11875500BT 

規(guī)格：500ml

保存溫度：2-8度

蘇州千舍批發(fā)供應hyclone液體培養(yǎng)基,，Gibco胎牛血清,，無外泌體血清,，Gibco液體培養(yǎng)基,，SERANA胎牛血清

蘇州千舍生物對液體培養(yǎng)基常見問題總結：

1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好？還是冷凍好,？

　　要冷藏?。∫驗橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時,，其溶液的pH值會發(fā)生改變，溶液往往變堿,，某些成分溶解也會受到影響對細胞生長不利,。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年,。

　　2. 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用，及使用方法,。

　　幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求，細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質,，在缺少谷氨酰胺時,，細胞生長不良而死亡。所以,，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺,。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應置-20 ?C冰凍保存,，用前加入培養(yǎng)基中,。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時，應重新加入原來量的谷氨酰胺,?；A醫(yī)學細胞中心在其服務項目中配制分裝了高濃度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支）。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中,，其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基。包裝為粉紅色,，-24?C保存,。

　　3.液體培養(yǎng)用液pH對細胞生長的影響

　　由于,，大多數(shù)細胞適宜pH為7.2~7.4，偏離此范圍對細胞將產生有害的影響,。各種細胞對pH的要求也不*相同,，原代培養(yǎng)細胞一般對pH變動耐受差,，無限細胞系耐受力強,。

　　但總體來說,，細胞耐酸性比耐堿性強一些,，偏酸環(huán)境中更利于細胞生長,。因此,，我們在配制培養(yǎng)用液時,，可把液體的pH稍微調得偏酸一些,。液體在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時,，溶液的pH還會向上浮動0.2左右。

　　4.細胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎,？

　　不見得,！因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度,、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關,。通常情況下，pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力zui強,。另外,，鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力,。我們每次進行傳代消化前,，一定要用D-Hanks液或PBS液反復沖洗細胞培養(yǎng)瓶，以便于將含血清的培養(yǎng)基沖洗干凈,，這樣就能大大提高消化液的消化能力,。本中心通常使用的消化液濃度為：

　?。?）０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　?。?）０.２５％胰蛋白酶＋０.０３％ＥＤＴＡ,。

　　（3）0.25% 胰蛋白酶

　　溶液ｐＨ８.０～９.０,；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液配制。

　　多數(shù)細胞傳代消化可使用０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ這種消化液,。

　　Gibco 1640培養(yǎng)基（C11875500BT） 購買蘇州千舍細胞注意事項：

　　一,、客戶收到細胞先不開蓋,，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X,，200X各一張）,，排除細胞本身污染的情況；

　　收到細胞未開封,，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞,。

　　二、如為貼壁細胞,，請在顯微鏡下觀察細胞密度：

　　1. 未超過80%匯合度時,，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水，噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,，嚴格無菌操作,；然后打開蓋子，先把培養(yǎng)基吸出10ml左右,，放在離心管里,，然后瓶口過火（嚴禁直接傾倒），這樣可以保證不污染,，再用10ml的移液管,，將剩余的培液全部吸出，放于離心管中,，培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了,。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細胞生長情況調整）之后,，傳代或者凍存。

　　2. 超過80%匯合度時,，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng),。具體步驟如下：

　　1) 棄去培養(yǎng)液，用3ml PBS（不含鈣,，鎂離子）洗1-2次,；

　　2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培養(yǎng)瓶中，倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后,，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散,，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,，細胞隨即脫落下來；

　　3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,，吸出,，分到新的培養(yǎng)瓶中，按要求分瓶,。

　　三,、如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液,，1000轉/分鐘離心5分鐘,，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶,。

　　注意：換液時一半用我們的培養(yǎng)基,，一半用你們的，以免細胞不適應而造成生長不好,。

　　四,、細胞出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些,？判定標準是什么,？

　　（1）細胞運輸途中遭遇的各種問題,，細胞丟失,、破損、漏液等,，重發(fā),；

　　（2）凍存的細胞復蘇后，絕大多數(shù)細胞未存活,，重發(fā),；

　　（3）存活的細胞靜置24小時后,，絕大多數(shù)細胞未存活,，重發(fā)；

　?。?）凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,，出現(xiàn)污染，重發(fā),；

?。?）視具體情況而定。

　　五,、細胞出現(xiàn)問題,，不予以重發(fā)的情況有哪些？

　 （1）客戶造成細胞污染,，不重發(fā),；

　　（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,，不重發(fā),；

　　（3）細胞狀態(tài)不好,，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,，不重發(fā)；

　?。?）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā),；

　?。?）細胞收到2天內，未告知,，不重發(fā),；

　　（6）視具體情況而定,。

→→→→蘇州千舍生物,，進口胎牛血清搬運工，只做*←←←←

Gibco液體培養(yǎng)基,， MEM液體培養(yǎng)基,，貨號：C11095500BT

Gibco液體培養(yǎng)基， MEM液體培養(yǎng)基,，貨號：C11095500BT

Gibco液體培養(yǎng)基,，DMEM低糖培養(yǎng)基 貨號： C11885500BT

Gibco液體培養(yǎng)基,，DMEM高糖培養(yǎng)基 貨號： C11995500BT

Gibco液體培養(yǎng)基，1640培養(yǎng)基 貨號：C11875500BT

Gibco液體培養(yǎng)基,，DMEM/F12（1：1）培養(yǎng)基 貨號：C11330500BT

Gibco緩沖液 PBS7.4 貨號：C10010500BT

Gibco 胰酶溶液 貨號：25200-056 100ML

Gibco 胰酶溶液 貨號：25200-072 500ML

Gibco 雙抗溶液 貨號：15140-122

SBI無外泌體胎牛血清 ,，原裝行貨，重磅襲來,，低價銷售,，熱爆*

脂質體2000 原裝 GIBCO 11668-027原裝 0.75ml *

脂質體2000 原裝 GIBCO 11668-019原裝 1.5m    *

脂質體3000 原裝GIBCO L3000-015 原裝1.5ML   *

★SIGMA試劑現(xiàn)貨3-5天

★Gibco各款血清：10099-141澳洲、16000-044北美,、10270-106南美,，10437-028墨西哥，10091-148新西蘭胎牛血清

★Hyclone各款血清:30084.03澳洲,、30087.02南美,、sv30087.03烏拉圭

★小牛血清，BI胎牛血清（04-001-1ACS,、04-002-1A,、04-400-1A）

★SIGMA血清（F2442），PAN(ST30-3302,、ST30-2602)

★德國SERANA血清中國代理

★Gibco培養(yǎng)基：C11995500BT(DMEM高糖）,、C10010500BT（PBS）、C11875500BT（1640）

★Hyclone培養(yǎng)基:SH30021.01,、SH300243.01,、SH30265.01、SH30256.01 

★公司常備現(xiàn)貨：lipo2000（0.75ml）11668-027,、（1.5ml）11668-019
 lipo3000（0.75ml）L3000-008,、（1.5ml）L3000-015 
 RNAiMax（0.75ml）13778-075、（1.5ml）13778-150
 trizol（100ml）15596-026,、（200ml）15596-018 
 trizol LS（100ml）10296010,、（200ml）10296028
 B27  (10ML)  17504-044   胰酶（100ml）25200-056
 雙抗（100ml）15140-122    西班牙瓊脂糖（100g）
 羅氏潮霉素B 1g/20ml     MERCK蛋白酶K(100g)
 DMSO-二甲基亞砜(100ml）D2650 日本同仁cck8試劑盒