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RPMI 1640 培養(yǎng)基,,含L-谷氨酰胺,無硝酸鈣,。 SH30809.01B
HyClone DMEM高糖液體培養(yǎng)基(貨號:SH30022.01B) 供應(yīng),,另千舍生物專業(yè)供應(yīng)dmem高糖培養(yǎng)基 hyclone dmem f12 f10溶液 hyclone dmem培養(yǎng)基 dmem培養(yǎng)基成分 dmem f12培養(yǎng)基 dmem*培養(yǎng)基 gibco dmem培養(yǎng)基 dmem培養(yǎng)基價格 dmem高糖 pda液體培養(yǎng)基等
Hyclone 液體培養(yǎng)基 現(xiàn)貨!現(xiàn)貨,!
PBS緩沖液SH30256.01
品牌 名稱 描述 貨號 規(guī)格 溫度 價格(元)
BME培養(yǎng)基 EBSS*,,含L-谷氨酰胺。SH30157.01 500 ml 2-8°C 198
DMEM培養(yǎng)基 高糖,,含4.0 mM L-谷氨酰胺,,不含丙***酸鈉。SH30022.01B 500 ml 2-8°C 50
SH30022.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,106
DMEM培養(yǎng)基 高糖,,不含L-谷氨酰胺與丙***酸鈉,。SH30081.01 500 ml 2-8°C 192
SH30081.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,117
DMEM培養(yǎng)基 高糖,,含4.0 mM L-谷氨酰胺、丙***酸鈉,。SH30243.01B 500 ml 2-8°C 50
SH30243.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,117
Gibco優(yōu)等胎牛血清(貨號:10099-141)原裝*,,提供COA質(zhì)檢報告以及其他相關(guān)資料,充足干冰運輸,,當日或次日發(fā)貨,。
胎牛血清作用:
1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,,以及主要的低分子營養(yǎng)物,。
2. 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素,、脂類,、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力,。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁,、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源,。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,,保護細胞不受傷害。
7.內(nèi)毒素極低,,其次無菌過濾,,后三次為0.1um無菌過濾處理。
8.進行細菌,、真菌,、支原體、病毒及病毒抗體檢測,,符合動物協(xié)會要求
9.建議使用范圍:科研使用,,細胞培養(yǎng)
10.儲存:-20℃凍存,避免反復(fù)凍融,,4°C保存不超過1個月,。反復(fù)凍融會破壞血清中有效成 分,影響血清品質(zhì),。
胎牛血清,、小牛血清、新生牛血清之間的區(qū)別:
1,、采血時間不同:
胎牛血清(Fetal Bovine Serum)是在母牛懷孕5-8個月時,,通過胎牛心臟穿刺采血獲取的血清,。新生牛血清(Newborn Calf Serum)是來自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。小牛血清(Calf Serum)采自出生后2周至1年內(nèi)的小牛靜脈取血,。
2,、組份與比例不同:
兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子,、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,。胎牛血清尤其含有胚胎發(fā)育所必需的生長因子。一些生長因子到胎牛10個月時就消失了,。
3,、用途與用法不同:
某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可,。使用濃度一般在5%-10%,,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,,若存放在4℃不可超過一個月,。解凍血清時,推薦我們總結(jié)出來的三步法(見下表),,可預(yù)防沉淀發(fā)生,。不推薦血清4℃過夜融化,更不能直接將冷凍的血清放入37℃水浴或者溫箱中,。因為血清在融化時,,蛋白先融,冰塊后融,,局部蛋白濃度過高,,易發(fā)生沉淀。血清在解凍后,,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,,避免反復(fù)凍融。
關(guān)于細胞培養(yǎng)中的“黑膠蟲”:
在細胞培養(yǎng)中??梢姷脚囵B(yǎng)液中出現(xiàn)大小不等,、形態(tài)不同的黑色顆粒,。只要這種黑色顆粒一出現(xiàn),,我們的細胞不是停止生長就是陸續(xù)死亡。人們常稱這種顆粒為「黑膠蟲」,。聽說,,這種黑色顆粒還會「游動」?小編想想都雞皮疙瘩掉一地,。難道真的是細胞長蟲子了嗎,?
關(guān)于「黑膠蟲」的傳說
① 分類
關(guān)于「黑膠蟲」的分類,,學(xué)術(shù)界沒有明確給予說法。
1. 部分認為黑膠蟲污染是微生物感染,,但是沒把它歸為某種特定的生物類型,,目前「黑膠蟲」尚屬一種未知生物。根據(jù)中國病毒所和軍科院的鑒定,,這可能是一種寄生于牛血清內(nèi)的原蟲,,似乎和草履蟲和變形蟲有類似之處,但是由于課題經(jīng)費不夠而不能繼續(xù)下去,,終也沒有有力證明黑膠蟲是否為原蟲,;
2. 同時,另一部分學(xué)者不認為所謂的「黑膠蟲」是一種生物污染,,而認為是細胞碎片,,是在細胞培養(yǎng)時由于細胞凋亡或死亡產(chǎn)生的;
3. 此外,,還有學(xué)者認為「黑膠蟲」是玻璃瓶中類似氧化硅的物質(zhì),。
② 形態(tài)
直徑約 0.5-1 μm,顯微鏡觀察為黑色,,線狀,、桿狀或橢圓形,不同人員觀察到的形態(tài)不一致,。
③ 運動
顯微鏡下有典型的布朗運動(不規(guī)則的原地小距離抖動),,即很多細胞培養(yǎng)者看到的,像黑色的小蟲游來游去,。但是在物理學(xué)上來說,,只要顆粒足夠小,即可在液體中呈布朗運動,,因此,,呈「布朗運動」并不足以說明「黑膠蟲」為生物體。
④ 抗性
耐高溫高壓,,抗細菌和抗霉菌的藥物對「黑膠蟲」無效,,可以保守的判定「黑膠蟲」不屬于細菌、霉菌,。
⑤ 環(huán)境
可存在于細胞培養(yǎng)基中,,可隨細胞傳代存在。
關(guān)于「黑膠蟲」的猜測
① 細胞碎片
隨著細胞培養(yǎng)的繼續(xù),,部分細胞開始衰亡,,細胞膜結(jié)構(gòu)破裂,破裂之后的細胞內(nèi)容物泄露到培養(yǎng)液中。尤其是溶酶體的破壞,,連續(xù)性地造成其他細胞和細胞器的損傷,,如果換液不很勤,又會出現(xiàn)進一步破壞和殘渣的出現(xiàn),。 假設(shè),,這種黑點是某種生物,其大小及運動狀況達到了用顯微鏡可以觀察出的程度,,那么其營養(yǎng)代謝和能量需求也就可想而知,,培養(yǎng)液中的養(yǎng)分消耗、酸堿含量程度等都應(yīng)發(fā)生明顯變化,。然而,,并沒有報道指出這些狀況出現(xiàn)在在所謂的「黑膠蟲」感染過程中,也沒有有力證據(jù)指出這種黑點的出現(xiàn)會對細胞狀態(tài)產(chǎn)生直接影響,。當細胞狀態(tài)下降時,,一些學(xué)者觀察到黑點明顯增多,這很有可能是細胞狀態(tài)下降時,,細胞衰亡產(chǎn)生的細胞碎片,。
② 氧化硅類似物
有報道稱,這種黑點其實不是一種生物,,是無機物,,其本質(zhì)是玻璃培養(yǎng)瓶里的硅顆粒,會在一定程度上影響細胞生長,。細胞狀態(tài)好時,,不明顯;細胞狀態(tài)較差,、數(shù)量較少時才容易看到,,因此建議使用一次性培養(yǎng)瓶。
③ 支原體
有人曾認為這種黑點可能是支原體污染,,理由是它通過濾膜,,但已有充分的證據(jù)顯示它并不是支原體:
1. 這種黑點光鏡下可見,支原體在光鏡下不可見,。
2. 這種黑點在多種染色后可見,,HOECHST 即能將它染色,而支原體用普通染色法不易著色,,姬姆薩染色淺,,革蘭染色為陰性。因此,,「黑膠蟲」是支原體的可能性很小,。
④ 寄生蟲原蟲
有人認為這種黑點屬于寄生類的原蟲,,在 400 倍以上的高倍鏡下可以清楚的看到這種黑點有兩種不同形態(tài),,一種較大,,運動較慢;另一種較小,,運動較快,;個體小分布在大的周圍。同時,,這種黑點的存在不依賴于活細胞,。有人做過這樣的試驗,單純培養(yǎng)有黑點污染的血清,,直到滿視野遍布大小不一的黑點,。據(jù)說,病毒所和軍科院曾開展過相關(guān)研究,,然而由于課題經(jīng)費不足沒有繼續(xù)進行,,目前,并沒有明確的證據(jù)顯示這種黑點為原蟲,。
解析
從前面關(guān)于這種神秘的黑點的描述可以看出,,人們遇到的黑點其實并不一樣,有像細胞碎片的,、有像氧化硅的,、有像支原體的、有像原蟲的等等,。目前,,國內(nèi)各實驗室環(huán)境、器材條件參差不齊,,實驗人員的操作質(zhì)量也不盡相同,,很多人發(fā)現(xiàn)細胞被細菌污染了,不好處理,,而卻描述出來的現(xiàn)象和流傳的「黑膠蟲」類似,,一傳十,十傳百,,「黑膠蟲」被傳說的變得越來越神秘,,對「黑膠蟲」的描述也五花八門,眾口不一,。很多實驗人員細胞培養(yǎng)失敗,,就會把失敗的原因歸結(jié)為有無法處理的黒膠蟲污染。其實,,黑膠蟲是否存在,,還有待于科學(xué)的發(fā)展,。但有一點可以肯定的,大部分人發(fā)現(xiàn)的「黒膠蟲」并不是真正那個未知的黒膠蟲,,而是常見的細菌、真菌,、原蟲等微生物污染,。
報道
在《細胞生物學(xué)雜志》中《對細胞培養(yǎng)中一種黑色運動顆粒性質(zhì)的研究》論文,文中經(jīng)過多種實驗驗證后指出:「在組織培養(yǎng)中常觀察到一種大小不等,、形態(tài)不同的黑色運動顆粒,,它對培養(yǎng)細胞的生長有不良影響,有時甚至導(dǎo)致細胞死亡,,并能在一定條件下隨培養(yǎng)時間的增長而增加其數(shù)量,。人們常稱這種顆粒為黑膠蟲或中毒顆粒,我們?nèi)〖毎囵B(yǎng)用的血清,、培養(yǎng)基和其他材料中的黑色運動顆粒,,應(yīng)用光學(xué)顯微鏡、透射電鏡,、掃描電鏡對其形態(tài)學(xué)進行系統(tǒng)觀察,;并用顯微攝影觀察其活動情況;用紫外分光及電泳透析進行生化分析
結(jié)果證明:該顆粒為無膜式結(jié)構(gòu),,無蛋白質(zhì)成分,,中性環(huán)境下帶正電荷,能譜掃描電鏡分析為硅復(fù)合物,,我們稱之為硅小體,,證明其活動屬布朗運動。本文進一步用電感耦合等離子發(fā)射光譜分析了培養(yǎng)液及雙蒸水中可溶性的硅含量在不同質(zhì)量的容器及不同時間的變化,,證明了硅小體的增多主要來源于培養(yǎng)液對玻璃器皿的侵蝕,,或來源于被培養(yǎng)的細胞。
DMEM培養(yǎng)基 高糖,,含L-谷氨酰胺,、HEPES,不含丙***酸鈉,。SH30249.01 500 ml 2-8°C 261
SH30249.02 1000 ml 2-8°C 508
DMEM培養(yǎng)基 高糖 不含鈣,、鎂。SH30262.01 500 ml 2-8°C 213
DMEM培養(yǎng)基 高糖含L-谷氨酰胺,,不含酚紅與丙***酸鈉,。SH30284.01 500 ml 2-8°C 188
DMEM培養(yǎng)基 高糖,含丙***酸鈉,,不含L-谷氨酰胺,。SH30285.01 500 ml 2-8°C 192
SH30285.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,129
DMEM培養(yǎng)基 高糖,,改良型,不含酚紅,、丙***酸鈉,、L-谷氨酰胺。SH30585.02 1000 ml 2-8°C 312
DMEM培養(yǎng)基 高糖,,改良型,,不含酚紅,、L-谷氨酰胺,,含丙***酸鈉。SH30604.01 500 ml 2-8°C 284
DMEM培養(yǎng)基 低糖,,含4.0 mM L-谷氨酰胺,、110 mg丙***酸鈉。SH30021.01B 500 ml 2-8°C 50
SH30021.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,106
SH30021.02 1000 ml 2-8°C 297
DMEM/F12 1:1培養(yǎng)基 2.50 mM L-谷氨酰胺,、15 mM HEPES,。SH30023.01B 500 ml 2-8°C 50
SH30023.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,180
SH30023.02 1000 ml 2-8°C 312
DMEM/F12 1:1培養(yǎng)基 含HEPES,不含L-谷氨酰胺,。SH30126.01 500 ml 2-8°C 297
SH30126.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,748
DMEM/F12 1:1培養(yǎng)基 含L-谷氨酰胺,、HEPES、丙***酸鈉,。SH30261.01 500 ml 2-8°C 199
DMEM/F12 1:1培養(yǎng)基 含L-谷氨酰胺,,不含HEPES。SH30271.01 500 ml 2-8°C 222
SH30271.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,308
DMEM/F12 1:1培養(yǎng)基 含L-谷氨酰胺,,不含HEPES,、酚紅。SH30272.01 500 ml 2-8°C 222
Hams培養(yǎng)基 F10培養(yǎng)基,,含L-谷氨酰胺,。SH30025.01 500 ml 2-8°C 210
Hams培養(yǎng)基 F12培養(yǎng)基, 1X,含1.00 mM L-谷氨酰胺,。SH30026.01B 500 ml 2-8°C 50
SH30026.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,212 PBS緩沖液SH30256.01
Hams培養(yǎng)基 F12培養(yǎng)基, Kaighns改良型,。SH30526.01 500 ml 2-8°C 225
Hams培養(yǎng)基 TNM-FH培養(yǎng)基 SH30280.02 500 ml 2-8°C 357
SH30280.03 1000 ml 2-8°C 535
IMDM培養(yǎng)基 含L-谷氨酰胺、HEPES,,不含α-硫代甘油,。SH30228.01B 500 ml 2-8°C 50
IMDM培養(yǎng)基 不含L-谷氨酰胺。SH30259.01 500 ml 2-8°C 265
Leibovitz培養(yǎng)基 (Leibovitz Medium) SH30525.01 500 ml 2-8°C 234
M199培養(yǎng)基 EBSS*,,含L-谷氨酰胺,。 SH30253.01B 500 ml 2-8°C 50
SH30253.02 1000 ml 2-8°C 294
McCoys 5A培養(yǎng)基 含L-谷氨酰胺。SH30200.01 500 ml 2-8°C 219
SH30200.FS 6 x 500 ml 2-8°C 857
McCoys 5A培養(yǎng)基 含L-谷氨酰胺,,不含酚紅,。SH30270.01 500 ml 2-8°C 219
MEM培養(yǎng)基 EBSS*,,含2.0 mM L-谷氨酰胺。SH30024.01B 500 ml 2-8°C 50
SH30024.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,252
SH30024.02 1000 ml 2-8°C 312
MEM培養(yǎng)基 EBSS*,,不含L-谷氨酰胺,。SH30244.01 500 ml 2-8°C 215
SH30244.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,226
SH30244.02 1000 ml 2-8°C 312
MEM培養(yǎng)基 α改良型,含L-谷氨酰胺,、核糖核苷及脫氧核糖核苷,。SH30265.01B 500 ml 2-8°C 50
SH30265.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,764
MEM培養(yǎng)基 α改良型,不含L-谷氨酰胺,、核糖核苷及脫氧核糖核苷,。SH30568.01 500 ml 2-8°C 324
MEM培養(yǎng)基 Richters改良型,含L-谷氨酰胺,、酚紅,。SH30601.01 500 ml 2-8°C 234
RPMI 1640培養(yǎng)基 1X,含2.05 mM L-谷氨酰胺(同SH30091),。SH30027.01 500 ml 2-8°C 192
SH30027.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,106
SH30027.02 1000 ml 2-8°C 297
RPMI 1640培養(yǎng)基 不含L-谷氨酰胺,。SH30096.01 500 ml 2-8°C 192
SH30096.FS 6 x 500 ml 2-8°C 1,117
SH30096.02 1
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