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Sciencell平滑肌細胞培養(yǎng)基1101
品牌:Sciencell
英文名:Smooth Muscle Cell Medium (SMCM)
貨號:1101
價格:¥2070.00
Sciencell平滑肌細胞培養(yǎng)基1101簡介:
平滑肌細胞培養(yǎng)基是專門為正常人類平滑肌細胞體外培養(yǎng)設計的適于其生長的培養(yǎng)基。是經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基,,包含必需和非必需氨基酸,、維生素、有機和無機化合物,、激素,、生長因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(2%),。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽,,在含5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中平衡后pH值為7.4,。該培養(yǎng)基的配方能夠選擇性的促進正常人類平滑肌細胞體外培養(yǎng)中的增殖和生長,并為其達到理想營養(yǎng)平衡狀態(tài),。
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常見問題問答:
一,、血清或培養(yǎng)基產(chǎn)生了顏色或沉淀的問題:
問:我用的是四季青的胎牛血清,,56℃30分鐘滅活后出現(xiàn)了白色少量絮狀沉淀,是不是污染,?還能不能 再用,?血清的生產(chǎn)日期是2006年7月(現(xiàn)在是2007年6月11日),。
答:應該問題不大。你可以取少量血清放入培養(yǎng)皿中,,37℃過夜培養(yǎng)看看就知道是否污染了,。血清中沉淀 物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在 血渭解凍后,,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的質(zhì)量。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)時能否加血清?如果加了會有什么結(jié)果,?為什么懸浮細胞培養(yǎng)時就不能加血清,?
答:血清是細胞培養(yǎng)基中重要的培養(yǎng)成份之一,對細胞生長有廣泛影響,。在細胞培養(yǎng)時,,我們通常會加入 10%的血清。血清的質(zhì)量對細胞培養(yǎng)的成功至關重要,。一般說來,,牛血清包括以下成分:生長因子(如激素,白細胞介 素等),,他們可以促進細胞生長,;貼附因子,他們可以促進細胞的貼壁,,往往只有細胞貼壁才能增值(懸浮培養(yǎng)的細胞 除外),;蛋白質(zhì)(如血清白蛋白,球蛋白等),,既可以作為營養(yǎng)物質(zhì),,又可以中止胰酶的作用;還有很多成分不明的物 質(zhì),。血清還可以起到解毒作用,如脂肪酸,、重金屬和某些蛋白酶的毒性,。血清還可以是細胞免受機械損傷,。因此,無 論是貼壁細胞還是懸浮細胞,,血清是*的,。除非因?qū)嶒炓鬅o血清培養(yǎng)時,例如:為使細胞同步化時,,我們會 采用無血清培養(yǎng)的,。單純的說懸浮細胞培養(yǎng)不能加血清就沒有太多的道理了。
三,、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理:
答:血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,,而血纖維蛋白(形成 凝血的蛋白之一)在血渭解凍后,,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培 養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
四,、如何避免沉淀物的產(chǎn)生,?
答:我們建議您在使用血清的時候,注意下列的操作 :
(1)解凍血清時,,請按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),,若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃ 至37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。
(2)解凍血清時,,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生,。
(3)請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,,血清會變得混濁,,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會 因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
(4)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,,若非必要,,可以無須做此步驟。
(5)若必須做血清的熱滅活,,請遵守56℃,,30 分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻,。溫度過高,,時間過久或搖 晃不均勻,都會造成沉淀物的增多,。
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