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牛γ干擾素(IFN-γ) ELISA試劑盒蘇州千舍生物為您傾情供應(yīng),,成熟技術(shù),嚴(yán)格工藝流程,,*抗體/抗原,,嚴(yán)格QC檢測后方可出庫,請(qǐng)放心購買,!
牛γ干擾素(IFN-γ) ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,,避免長時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
9)按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
1,、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液,。
3,、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔,、待測樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍),;空白對(duì)照孔不加,。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。
5,、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。
6,、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,,空白對(duì)照孔不加。
7,、溫育:重復(fù)4的操作,。
8、洗板:重復(fù)5的操作,。
9,、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,,37℃避光顯色15min,。
10、終止:取出酶標(biāo)板,,每孔加終止液50μL,,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11,、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值),。
12,、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,,再根據(jù)樣本的OD值,,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算,。*終濃度為實(shí)際測定濃度乘以稀釋倍數(shù),。
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