豬總膽固醇（TC）ELISA試劑盒蘇州千舍生物為您傾情供應(yīng)，成熟技術(shù)，嚴(yán)格工藝流程,，*抗體/抗原,，嚴(yán)格QC檢測(cè)后方可出庫，請(qǐng)放心購(gòu)買,！

本試劑盒只能用于科學(xué)研究,，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。

【豬總膽固醇（TC）ELISA試劑盒操作步驟】

1,、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒,，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。

2,、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液,。

3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,，固定于框架上,，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,，記錄各孔位置,，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）,；空白對(duì)照孔不加。

4,、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。

5、洗板：棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板）,。

6,、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL，空白對(duì)照孔不加,。

7,、溫育：重復(fù)4的操作。

8,、洗板：重復(fù)5的操作,。

9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL,，37℃避光顯色15min,。

10、終止：取出酶標(biāo)板,，每孔加終止液50μL,，終止反應(yīng)（顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11,、測(cè)定：以空白孔調(diào)零,，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值（OD值）,。

12,、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算,。*終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)。