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QS3223-小鼠(Mouse)白細(xì)胞介素12ELISA試劑盒
  • QS3223-小鼠(Mouse)白細(xì)胞介素12ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2024-11-29 21:00:09

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小鼠(Mouse)白細(xì)胞介素12ELISA試劑盒

小鼠(Mouse)白細(xì)胞介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒樣品收集,、處理及保存方法
1)血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測(cè),。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

小鼠(Mouse)白細(xì)胞介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒的準(zhǔn)備
1)標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存,。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻,。
2)洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

小鼠(Mouse)白細(xì)胞介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒操作步驟
1)使用前,,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,,37溫育1小時(shí),。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37溫育30分鐘,。
6)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A,、B各50ul,輕輕振蕩混勻,,37溫育10分鐘,。避免光照。
8)取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果,。
9)在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。

 

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