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人a2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒蘇州千舍生物為您傾情供應,,成熟技術(shù),嚴格工藝流程,,*抗體/抗原,,嚴格QC檢測后方可出庫,請放心購買,!
人a2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,,應將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人a2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒的準備
1)標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻,。
2)洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋,。
人a2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒操作步驟
1)使用前,,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔,。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔,、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
7)每孔加入底物A,、B各50ul,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應立即測定結(jié)果,。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值,。
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