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GEMINI胎牛血清(貨號:900-108)
GEMINI公司,,成立于1985年,,位于加利福尼亞南部Calabasas市,1999年,,遷加利福尼亞北部Woodland市,。Gemini公司在銷售的動物血清產品,全部來自于澳洲的子公司,,血源主要為澳大利亞,、新西蘭、巴拿馬,、烏拉圭,、巴西和阿根廷等。Gemini始終以“為客戶提供高質量產品”為首要目標,,尤其在細胞培養(yǎng)用胎牛血清方面,,Gemini產品質量好,、價格低,和同類產品相比競爭力強,。
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Gemini已登錄中國大陸,,6年之久,Gemini血清已走進全國500多家實驗單位,,以其好的質量,、完善的售后,較低的價格,,越來越被國內科研人員所認可,。
GEMINI胎牛血清,素爾生物常備現(xiàn)貨之一:
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◆細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?
一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,,首先,,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁。
然后,,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),,黑點是否游動。
如果細胞被污染,,微生物則會大量繁殖,,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁,。污染包括細菌污染,、支原體污染等。
◆如果在鏡下觀察細胞,,生長狀態(tài)良好,,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,,那么,,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關:
(1) 細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;
(2) 血清質量不好,,反復凍融的結果;
(3) 配制培養(yǎng)基的pH值偏高,,不宜細胞生長;
(4) 配制培養(yǎng)基的水質、容器不合格,??捎秒x心、過濾的方法去除這些黑點;
(5) 培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,,可能是原代組織中的雜質,,多次傳代可以消除,。
◆有必要做熱滅活嗎?
熱滅活血清對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。
◆小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項?
來源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum,,F(xiàn)BS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,,新生牛(小牛)血清(Calf serum,CS)采自出生10至14 天的小牛,。
各成分占比不同:兩者所含的促細胞生長因子,、促貼附因子、激素及其他活性物質等組份與比例不同,,用途與用法不同:某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可,,使用濃度不同,,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%,。
血清保存和使用須注意:血清應保存在-5℃至-20℃,,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時 ,,應先將血清至于2-8℃,,并經常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,,不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,,顏色加深,粘稠度也會增加,,血清在解凍和熱滅活后,應按用量分裝并于-20℃保存,,避免反復凍融。
常見問題問答:
一,、血清或培養(yǎng)基產生了顏色或沉淀的問題:
問:我用的是四季青的胎牛血清,,56℃30分鐘滅活后出現(xiàn)了白色少量絮狀沉淀,是不是污染,?還能不能 再用,?血清的生產日期是2006年7月(現(xiàn)在是2007年6月11日),。
答:應該問題不大,。你可以取少量血清放入培養(yǎng)皿中,37℃過夜培養(yǎng)看看就知道是否污染了,。血清中沉淀 物的出現(xiàn)有許多種原因,,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在 血渭解凍后,,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量,。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)時能否加血清,?如果加了會有什么結果,?為什么懸浮細胞培養(yǎng)時就不能加血清?
答:血清是細胞培養(yǎng)基中重要的培養(yǎng)成份之一,,對細胞生長有廣泛影響,。在細胞培養(yǎng)時,我們通常會加入 10%的血清,。血清的質量對細胞培養(yǎng)的成功至關重要。一般說來,,牛血清包括以下成分:生長因子(如激素,,白細胞介 素等),,他們可以促進細胞生長;貼附因子,,他們可以促進細胞的貼壁,,往往只有細胞貼壁才能增值(懸浮培養(yǎng)的細胞 除外);蛋白質(如血清白蛋白,,球蛋白等),既可以作為營養(yǎng)物質,又可以中止胰酶的作用,;還有很多成分不明的物 質。血清還可以起到解毒作用,,如脂肪酸,、重金屬和某些蛋白酶的毒性,。血清還可以是細胞免受機械損傷。因此,,無 論是貼壁細胞還是懸浮細胞,,血清是*的。除非因實驗要求無血清培養(yǎng)時,,例如:為使細胞同步化時,,我們會 采用無血清培養(yǎng)的。單純的說懸浮細胞培養(yǎng)不能加血清就沒有太多的道理了,。
三,、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理:
答:血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,,但普的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,,而血纖維蛋白(形成 凝血的蛋白之一)在血渭解凍后,也會存在于血清中,,亦是造成沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的質量,。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,,以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培 養(yǎng)基內一起過濾,。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜,。
四、如何避免沉淀物的產生,?
答:我們建議您在使用血清的時候,,注意下列的操作 :
(1)解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),,若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃ 至37℃),,實驗顯示非常容易產生沉淀物,。
(2)解凍血清時,,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生。
(3)請勿將血清置于37℃太久,。若在37℃放置太久,,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會 因此受到損害,,而影響血清的質量,。
(4)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,,若非必要,,可以無須做此步驟,。
(5)若必須做血清的熱滅活,,請遵守56℃,,30 分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻,。溫度過高,,時間過久或搖 晃不均勻,,都會造成沉淀物的增多,。
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