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GEMINI胎牛血清(貨號(hào):900-108)
GEMINI公司,成立于1985年,,位于加利福尼亞南部Calabasas市,,1999年,遷加利福尼亞北部Woodland市,。Gemini公司在銷售的動(dòng)物血清產(chǎn)品,,全部來自于澳洲的子公司,血源主要為澳大利亞,、新西蘭,、巴拿馬、烏拉圭,、巴西和阿根廷等,。Gemini始終以“為客戶提供高質(zhì)量產(chǎn)品”為首要目標(biāo),尤其在細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清方面,,Gemini產(chǎn)品質(zhì)量好,、價(jià)格低,和同類產(chǎn)品相比競(jìng)爭(zhēng)力強(qiáng),。
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Gemini已登錄中國(guó)大陸,,6年之久,Gemini血清已走進(jìn)全國(guó)500多家實(shí)驗(yàn)單位,,以其好的質(zhì)量,、完善的售后,較低的價(jià)格,,越來越被國(guó)內(nèi)科研人員所認(rèn)可,。
GEMINI胎牛血清,素爾生物常備現(xiàn)貨之一:
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◆細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?
一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,,首先,,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁。
然后,,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng),。
如果細(xì)胞被污染,,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁,。污染包括細(xì)菌污染,、支原體污染等。
◆如果在鏡下觀察細(xì)胞,,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,,那么,,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
(1) 細(xì)胞生長(zhǎng)過老,破碎的細(xì)胞殘骸;
(2) 血清質(zhì)量不好,,反復(fù)凍融的結(jié)果;
(3) 配制培養(yǎng)基的pH值偏高,,不宜細(xì)胞生長(zhǎng);
(4) 配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格,??捎秒x心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);
(5) 培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),,可能是原代組織中的雜質(zhì),,多次傳代可以消除。
◆有必要做熱滅活嗎?
熱滅活血清對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。
◆小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)?
來源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum,,F(xiàn)BS) 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum,,CS)采自出生10至14 天的小牛,。
各成分占比不同:兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子,、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,,使用濃度不同,,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%,。
血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,,若存放在4℃不可超過一個(gè)月。解凍血清時(shí) ,,應(yīng)先將血清至于2-8℃,,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,,不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會(huì)增加,,血清在解凍和熱滅活后,,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融,。
常見問題問答:
一,、血清或培養(yǎng)基產(chǎn)生了顏色或沉淀的問題:
問:我用的是四季青的胎牛血清,56℃30分鐘滅活后出現(xiàn)了白色少量絮狀沉淀,,是不是污染,?還能不能 再用?血清的生產(chǎn)日期是2006年7月(現(xiàn)在是2007年6月11日),。
答:應(yīng)該問題不大,。你可以取少量血清放入培養(yǎng)皿中,37℃過夜培養(yǎng)看看就知道是否污染了,。血清中沉淀 物的出現(xiàn)有許多種原因,,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在 血渭解凍后,,也會(huì)存在于血清中,,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的質(zhì)量,。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)能否加血清,?如果加了會(huì)有什么結(jié)果?為什么懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)就不能加血清,?
答:血清是細(xì)胞培養(yǎng)基中重要的培養(yǎng)成份之一,,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有廣泛影響。在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),,我們通常會(huì)加入 10%的血清,。血清的質(zhì)量對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的成功至關(guān)重要。一般說來,,牛血清包括以下成分:生長(zhǎng)因子(如激素,,白細(xì)胞介 素等),他們可以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng),;貼附因子,,他們可以促進(jìn)細(xì)胞的貼壁,,往往只有細(xì)胞貼壁才能增值(懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞 除外);蛋白質(zhì)(如血清白蛋白,,球蛋白等),既可以作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),,又可以中止胰酶的作用,;還有很多成分不明的物 質(zhì)。血清還可以起到解毒作用,,如脂肪酸,、重金屬和某些蛋白酶的毒性。血清還可以是細(xì)胞免受機(jī)械損傷,。因此,,無 論是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞,血清是*的,。除非因?qū)嶒?yàn)要求無血清培養(yǎng)時(shí),,例如:為使細(xì)胞同步化時(shí),我們會(huì) 采用無血清培養(yǎng)的,。單純的說懸浮細(xì)胞培養(yǎng)不能加血清就沒有太多的道理了,。
三、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理:
答:血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,,但普的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成 凝血的蛋白之一)在血渭解凍后,,也會(huì)存在于血清中,,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的質(zhì)量,。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培 養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜,。
四、如何避免沉淀物的產(chǎn)生,?
答:我們建議您在使用血清的時(shí)候,,注意下列的操作 :
(1)解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),,若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃ 至37℃),,實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。
(2)解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生。
(3)請(qǐng)勿將血清置于37℃太久,。若在37℃放置太久,,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì) 因此受到損害,,而影響血清的質(zhì)量,。
(4)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,,可以無須做此步驟,。
(5)若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,,30 分鐘的原則,,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,,時(shí)間過久或搖 晃不均勻,,都會(huì)造成沉淀物的增多。
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