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Hyclone DMEM高糖培養(yǎng)基SH30022.01
貨號(hào):SH30022.01
規(guī)格:500ml
簡(jiǎn)介:DMEM高糖液體培養(yǎng)基,,不含丙酮酸鈉
Hyclone DMEM高糖培養(yǎng)基SH30022.01相關(guān)主要產(chǎn)品:
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Hyclone液體培養(yǎng)基|Gibco液體培養(yǎng)基|Sigma液體培養(yǎng)基
細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),由于不同細(xì)胞來(lái)源不同的組織器官環(huán)境,,其體外培養(yǎng)所需的養(yǎng)分不盡相同,,選擇合適的培養(yǎng)基對(duì)細(xì)胞的培養(yǎng)至關(guān)重要。
如何選擇培養(yǎng)基
至于選擇何種培養(yǎng)基并沒(méi)有一定的標(biāo)準(zhǔn),,有幾點(diǎn)建議可供參考:
(1)建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞shou選的培養(yǎng)基,。
(2)其它實(shí)驗(yàn)室慣用的培養(yǎng)基不妨一試,許多培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞,。
(3)根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn),、實(shí)驗(yàn)的需要來(lái)選擇培養(yǎng)基,。如小鼠細(xì)胞株多選RPMI1640 ,。
(4)用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細(xì)胞,觀察其生長(zhǎng)狀態(tài),,可以用生長(zhǎng)曲線,、集落形成率等指標(biāo)判斷,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇zui佳培養(yǎng)基,,這是zui客觀的方法,,但比較繁瑣。
培養(yǎng)基種類
經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,,其中 DMEM,、 RPMI 1640、 MEM,、 DMEM/F12 都是應(yīng)用zui廣泛的培養(yǎng)基,。其他如 M199、 IMDM,、 L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng),。其具體的特征及應(yīng)用如下:
1、BME細(xì)胞培養(yǎng)基
基礎(chǔ)Eagle培養(yǎng)基(Basal Medium Eagle),,1955年Eagle設(shè)計(jì),,BSS+12種氨基酸+谷氨酰胺+8種維生素。簡(jiǎn)單,、便于添加,,適于各種傳代細(xì)胞系和特殊研究用,在此基礎(chǔ)上改良的細(xì)胞培養(yǎng)基品種有MEM,、DMEM,、IMDM等。
2,、MEM細(xì)胞培養(yǎng)基
又稱*Eagle培養(yǎng)基(Minimal Essential Medium),,1959年在Eagle's基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)上修改而來(lái),,刪去賴氨酸、生物素,,氨基酸濃度增加,,適合多種細(xì)胞單層生長(zhǎng),有可高壓滅菌品種,,是一種zui基本,、試用范圍zui廣的培養(yǎng)基,但因其營(yíng)養(yǎng)成分所限,,針對(duì)生產(chǎn)之特定細(xì)胞培養(yǎng)與表達(dá)時(shí),,并不一定是使用效果zui佳或者zui經(jīng)濟(jì)的培養(yǎng)基。
3,、DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基
DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基,,起初是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,,維生素濃度是MEM的4倍,,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。zui初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,,后來(lái)為了某些細(xì)胞的生長(zhǎng)需要,,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L,這就是大家常說(shuō)的低糖和高糖了,。
低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,特別適用于生長(zhǎng)速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng),。高糖更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,也適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來(lái)生長(zhǎng)點(diǎn)的克隆培養(yǎng),,也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng),。例如CHO細(xì)胞表達(dá)生產(chǎn)乙肝疫苗、CHO細(xì)胞表達(dá)EPO,。
4,、IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基
Guilber 和Iscove將Dulbecco' Medium 改良為 Iscove's Medium,用于培養(yǎng)紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞前體,。此種培養(yǎng)液含有硒,、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES,。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵,。IMDM還能夠促進(jìn)小鼠B淋巴細(xì)胞,LPS刺激的B細(xì)胞,,骨髓造血細(xì)胞,,T細(xì)胞和淋巴瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),。IMDM為營(yíng)養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液,因此可以用于高密度細(xì)胞的快速增殖培養(yǎng),。
5,、RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基
Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,針對(duì)淋巴細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì),,含BSS+21種氨基酸+維生素11種等?,F(xiàn)也用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),如哺乳動(dòng)物,、特殊造血細(xì)胞,、正常或惡性增生的白細(xì)胞,,雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng),,其它像K-562、HL-60,、Jurkat,、Daudi,、IM-9等成淋巴細(xì)胞,、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。
6,、HamF10細(xì)胞培養(yǎng)基
1963年Ham設(shè)計(jì),,含微量元素,可在血清含量低時(shí)用,,適用于克隆化培養(yǎng),。F10適用于倉(cāng)鼠、人二倍體細(xì)胞,,特適于羊水細(xì)胞培養(yǎng),。
7、DMEM/F12細(xì)胞培養(yǎng)基
Ham's F12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的,,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng),。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng),。由于營(yíng)養(yǎng)成分豐富,且可以使用較少血清,,故也常作為無(wú)血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,。
8、M199細(xì)胞培養(yǎng)基
1950年Morgan等設(shè)計(jì)的具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液,,即M-199,。除BSS外,,含有53種成分,為全面培養(yǎng)基,,主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng),。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長(zhǎng)期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來(lái)源的細(xì)胞,,并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞?,F(xiàn)廣泛用于病毒學(xué)、疫苗生產(chǎn),。
9,、McCoy5A培養(yǎng)基
1959年MeCoy為肉瘤細(xì)胞設(shè)計(jì),BSS+40種成分,??芍С侄喾N(如骨髓、皮膚,、肺和脾臟等)的原代移植物的生長(zhǎng),,除適于一般的原代細(xì)胞培養(yǎng)外,主要用于作組織活檢培養(yǎng),、一些淋巴細(xì)胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)支持,。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細(xì)胞、人淋巴細(xì)胞,、HT-29,、BHL-100等上皮細(xì)胞。
10,、L15 細(xì)胞培養(yǎng)基
L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細(xì)胞的培養(yǎng),,用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系,,氨基酸組成進(jìn)一步改良,,并由半乳糖替代了葡萄糖。
11,、α-MEM細(xì)胞培養(yǎng)基
α-MEM培養(yǎng)基在MEM培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了很多其他成分,,適合培養(yǎng)比較難養(yǎng)的細(xì)胞。
12,、Grace昆蟲(chóng)培養(yǎng)基
zui初設(shè)計(jì)為支持澳大利亞白星橙天蠶蛾 (Antherea eucalypti) 細(xì)胞 的生長(zhǎng),,是對(duì)Wyatt培養(yǎng)基的改良,以更接近 Antherea 血淋巴,。Grace用這種培養(yǎng)基建立了di一個(gè)連續(xù)細(xì)胞系,。適 當(dāng)補(bǔ)充添加劑后,該基本培養(yǎng)基已用于培養(yǎng)各種昆蟲(chóng)細(xì)胞,包括多種鱗翅類以及一些雙翅類昆蟲(chóng),。Grace昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)基主要作為 培養(yǎng)基基礎(chǔ),,用于培養(yǎng)Sf9 和Sf21細(xì)胞系,也用于其它鱗翅類昆蟲(chóng)細(xì)胞系的生長(zhǎng)和維持,。
另外,,為了使某些種類的細(xì)胞更好的生長(zhǎng),部分學(xué)者或廠家會(huì)對(duì)培養(yǎng)基的配方進(jìn)行適當(dāng)改良,,衍生出一部分改良型的培養(yǎng)基,。
同時(shí),動(dòng)物血清成分復(fù)雜,,各種生物大小分子混合在一起,,有些成分至今尚未搞清楚。血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)很有效,,但后期對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)物的分離,、提純以及檢測(cè)造會(huì)成一定困難。另外高質(zhì)量的動(dòng)物血清來(lái)源有限,,成本高,,限制了它的大量使用。隨著細(xì)胞治療的興起,,為了排除異體血清的影響,,現(xiàn)在已經(jīng)有不少適合間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基面世(添加細(xì)胞生長(zhǎng)有效因子、激素等)用于科研和臨床治療中的細(xì)胞培養(yǎng),。
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