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當前位置:蘇州千舍生物科技有限公司> 供求商機> IEC-6-大鼠小腸引窩上皮細胞IEC-6
產(chǎn)品名稱:大鼠小腸引窩上皮細胞IEC-6
貨號:QS-R005
細胞規(guī)格:1-3×10^6細胞量
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
培養(yǎng)液:DMEM(H)+10%FBS
凍存條件:80%*培養(yǎng)液+10%FBS+10%DMSO
運輸方式:常溫順豐運輸和干冰順豐運輸
貨 期:復蘇細胞需要1-2周,凍存細胞的需要3-5天(特殊情況會有說明)
質(zhì) 控:無支原體,、無污染,、符合標準
研究范圍:僅供科研使用
我司是一家專注于生命科學技術領域的高科技企業(yè),在廣大用戶的幫助和支持下,,經(jīng)過不懈的努力,,已成為國內(nèi)生命科學領域產(chǎn)品的主要供應商之一,一站式采購商城,,代理亞洲,、歐美國家300多種品牌,200萬種以上產(chǎn)品,。公司的服務和業(yè)務網(wǎng)絡遍及全國,,在同行獲得*。
大鼠小腸引窩上皮細胞IEC-6
我司主要經(jīng)營產(chǎn)品是國內(nèi)傳代細胞和細胞培養(yǎng)相關的生物試劑,。GIBCO,、HyClone、NTC,、SIGMA,、 BI 、GEMINI,、PAN和SBI無外泌體血清等高品質(zhì)血清,。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶,、雙抗,、無血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品,、ELISA 試劑盒等產(chǎn)品,。售后完善,我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購,!
我司以客戶為核心,,以產(chǎn)品質(zhì)量求生存,以售后服務求信譽,。我們通過不斷改進來提高效率,,絕不以犧牲品質(zhì)作為代價。“誠信,、創(chuàng)新,、嚴謹、專業(yè)”愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作,,共創(chuàng)輝煌,!
細胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細胞中供給細胞營養(yǎng)和促使細胞生殖增殖的基礎物質(zhì),,由于不同細胞來源不同的組織器官環(huán)境,其體外培養(yǎng)所需的養(yǎng)分不盡相同,,選擇合適的培養(yǎng)基對細胞的培養(yǎng)至關重要,。
按培養(yǎng)基的來源可分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基(目前使用的培養(yǎng)基絕大部分是合成培養(yǎng)基)。按其物質(zhì)狀態(tài)可分為干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類,,干粉培養(yǎng)基需由實驗者自己配制并滅菌(可靈活配制配比),,液體培養(yǎng)基由專業(yè)商家提供(用戶可直接使用,非常方便),。
合成培養(yǎng)基成分
主要成分有:氨基酸,、碳水化合物、無機鹽,、維生素及其它輔助物質(zhì),。
氨基酸:是組成蛋白質(zhì)的基本單位。不同種類的細胞對氨基酸的要求各異,,但有幾種氨基酸細胞自身不能合成,,必須依靠培養(yǎng)液提供,這幾種氨基酸稱為必需氨基酸,。其中谷氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸,,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡,。因此,,各種培養(yǎng)液中都有較大量的谷氨酰胺。但是,,由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,,應置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培養(yǎng)液內(nèi),。已含谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲存2 周以上時,,還應重新加入原來量的谷氨酰胺。
維生素:在細胞培養(yǎng)中,,盡管血清是維生素重要來源,,但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細胞系生長。
碳水化合物:是細胞生長主要能量來源,,其中有的是合成蛋白質(zhì)和核酸的成分,。主要有葡萄糖,、核糖,、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等,。
無機鹽:培養(yǎng)液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡,。此外,,通過提供鈉,鉀和鈣離子,,幫助細胞調(diào)節(jié)細胞膜功能,。培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素,細胞通常可耐受260mOsm/kg~320 mOsm/kg,。標準培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動,。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強酸或強堿中的物質(zhì),。向培養(yǎng)液中添加HEPES 時需按以下“緩沖系統(tǒng)”方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度,。
緩沖系統(tǒng):大多數(shù)細胞所需pH 在7.2 - 7.4。但是,,細胞培養(yǎng)zui適pH 值隨培養(yǎng)的細胞種類不同而不同,。成纖維細胞喜歡較高pH (7.4 - 7.7), 而傳代轉(zhuǎn)化細胞系則需要偏酸pH (7.0 - 7.4)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2 體系進行緩沖,,因此,,氣相中的CO2 濃度應與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2 濃度設定在5%,,培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為1.97g/L,;如果CO2 濃度維持在10%,培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為3.95g/L,。同時,,細胞培養(yǎng)瓶蓋不應擰得太緊,以保證氣體交換,。HEPES 是一種非離子緩沖液,,在pH 7.2 - 7.4 范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,但是非常昂貴,,在高濃度時對一些細胞可能有毒,。HEPES 緩沖液可與低水平的碳酸鈉(0.34g/L)共用,以抵消因額外加入HEPES 引起的滲透壓增加,。在這種培養(yǎng)條件下,,細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中,。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色,。
其它成分:
在一些較為復雜的培養(yǎng)液中還包括其它一些成分,,如:
(1)非必需氨基酸:有些細胞需要額外添加。
(2)丙酮酸鈉:是糖酵解的中間產(chǎn)物,可直接進出細胞,,作為替代碳源添加,。
(3)胰島素:可以促進細胞增殖。
(4)qing化可的松:可促進表皮細胞生長,。
(5)IL-2:促進淋巴細胞生長,,NK92依賴等。
(6)地塞米松:激素類,,促進部分細胞生長,。
(7)腎上腺素:促進部分細胞生長。
(8)轉(zhuǎn)鐵蛋白:為細胞內(nèi)化和細胞代謝提供所需的鐵,。
(9)2-qiu基乙chun(2-Mercaptoethanol,,2-Me):2-Me的活性部分是硫氫基,其中一個重要作用是使血清中含硫的化合物還原成谷胱甘肽,,能誘導細胞的增殖,,為非特異性的激活作用。另一個重要作用是促進分裂原的反應和DNA 合成,,增加植物凝集素(PHA)對淋巴細胞的轉(zhuǎn)化作用,。
液體培養(yǎng)基保存
液體培養(yǎng)基應于4℃冰箱避光保存,實驗前放入37℃預熱,。未加血清液體培養(yǎng)基有效期為12個月,。液體培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺會隨著儲存時間的延長而慢慢分解。如果細胞生長不良,,可以再添加適量L-谷氨酰胺,。
干粉培養(yǎng)基保存
4℃冰箱避光保存,有效期36個月,。
血清
細胞培養(yǎng)液中添加的血清有牛血清,、馬血清、人血清等,,其中牛血清是zui常用的血清,,分為胎牛、新生牛和小牛血清,。胎牛血清是從母牛破腹取出的胎牛中分離出的血清,,價格昂貴。新生牛血清是從剛出生的尚未哺乳的小牛中分離出來的血清,,如廠家能做到這一點,,新生小牛血清的質(zhì)量與胎牛血清的質(zhì)量相差不大。小牛血清,,如小牛出生后已哺乳,,從這種小牛中取出的血清中可能含有較多的生物活性物質(zhì),其質(zhì)量明顯不如前兩種。
血清的質(zhì)量,,種類及使用的濃度都有可能影響細胞的生長,,而不同批次的血清支持細胞生長的能力也不同,,尤其是對克隆細胞的生長,,某些批次血清可能含有毒性或抑制細胞生長的物質(zhì)。因此,,在購買大量血清之前,,必須對血清支持細胞生長能力進行檢測,然后再大量購買質(zhì)量好的同一批號的血清,,并注意以下幾點:
(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃–-70℃低溫冰箱中,。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,,因此,,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂,。
(2)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清,。
(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),,使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生,。切勿直接將血清從-20℃ 進入37℃解凍,,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,。
(4)熱滅活是指56℃, 30 分鐘加熱已*解凍的血清,。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活,。除非必須,,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,,而且還會影響血清的質(zhì)量,。補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。
(5)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,,同時血清中的有效成分會破會而影響血清質(zhì)量,。
(6)血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量,??捎秒x心3000rpm, 5 分鐘去除,也可不用處理,。
(7)顯微鏡下“小黑點”:經(jīng)過熱處理過的血清,,沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象“小黑點”,,常誤認為血清受污染,。一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,,但如果懷疑血清質(zhì)量,,則應立即停止使用,更換另一批號的血清,。
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