熱滅活胎牛血清（FBS500-WH-002）

產(chǎn)品名稱：熱滅活胎牛血清

英文名稱：Heat-inactivated fetal bovine serum

規(guī)格：500ml

品牌：WinSera ®（千舍出品）

品牌：WINSERA®國內(nèi)科研實驗室使用比較普遍,，價格相對實惠，能滿足很多常規(guī)細(xì)胞的培養(yǎng)需求,。

相對而言,，國產(chǎn)品牌血清由于采血的不可控性和生產(chǎn)工藝的差別，質(zhì)量參差不齊,，最讓人擔(dān)心的還是批間差異大,，質(zhì)量不穩(wěn)定。

它來了 它來了  2022它風(fēng)風(fēng)火火的走來了~~

童鞋甲：常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,，而時間則從15分鐘到60分鐘不等,，其中常用的手法是56℃熱處理30分鐘?？纯茨沭B(yǎng)的細(xì)胞是什么,，一般的話估計問題不大，要是很珍貴的細(xì)胞還是慎重一點啊,。

童鞋乙：熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質(zhì),， 在對補體滅活以外，熱處理同時也對血清中可能存在的支原體具有滅活作用?，F(xiàn)在好像不主張熱滅活,，熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來負(fù)面影響，對血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生,，此外,，有研究結(jié)果證實熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對細(xì)胞的促粘附作用。

專家A：實驗顯示,，即使對血清進(jìn)行正確的熱滅活處理,對大多數(shù)的細(xì)胞而言也是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),，或*沒有任何作用,，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低,。

而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是"小黑點",常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增,。

因此若非必須,可以不需要做熱處理這一步.如此一來,不但節(jié)省寶貴的時間,更確保血清的質(zhì)量。

專家B：血清從-20℃冰箱拿出來之后在常溫解凍,，然后混勻分裝成兩份,，一份滅活,，一份不滅活，比較這兩種血清對細(xì)胞是否有影響,。然后再確定是滅活還是不滅活,。這個過程最多也就一個星期。同時你還要考慮血清滅活與否對你后續(xù)的實驗有沒有影響,。

一般來說,，像巨噬細(xì)胞或者能被補體激活的而影響實驗過程或者結(jié)果的細(xì)胞，血清在使用前必須滅火,，還有就是原代細(xì)胞,，這類細(xì)胞必須使用滅活血清；但是像其他細(xì)胞株,，沒必要的,。因為滅火過程中不僅會滅火補體，還能損傷血清中的其他物質(zhì),，不利于細(xì)胞生長,。

最后是老營長的總結(jié)

（科學(xué)面對血清熱滅活的爭議）

成為常規(guī)操作的血清熱滅活

至少70%的研究者對血清的滅活僅僅是因為遵照常規(guī)操作，或者說認(rèn)為是理所當(dāng)然的,。常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,，而時間則從15分鐘到60分鐘不等，其中常用的手法是56℃熱處理30分鐘,。隨著血清采集,、處理、加工工藝的提高,，許多早先認(rèn)為是熱滅活的原因已經(jīng)不再成立,，只有少數(shù)對血清進(jìn)行熱滅活的研究者在實驗中證實了這一步驟的有效性和必要性。

熱敏補體與熱滅活

熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質(zhì),，但是在胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要,。Triglia和Linscott曾對商業(yè)胎牛血清中的補體成分進(jìn)行測定，他們發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有的C1,，C6僅達(dá)成年動物血清的1-3%,，而其它補體成分僅有成年動物的5-50%，至于補體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出,。通過補體固定實驗,，我們也在多個不同批次的胎牛血清中獲得了相似的結(jié)果。即使是在未稀釋的血清中,，也未發(fā)現(xiàn)有明顯的溶血現(xiàn)象,。

另外，多數(shù)實驗室在培養(yǎng)前將培養(yǎng)液進(jìn)行預(yù)熱的過程,，也對熱敏的補體有滅活的作用,。

支原體與熱滅活

在對補體滅活以外,，熱處理同時也對血清中可能存在的支原體具有滅活作用。多年以前,，450納米孔徑的濾膜被用于加工血清時,，血清中支原體的污染時有發(fā)生。針對這個問題,，HyClone使用100納米三層濾膜連續(xù)濾過技術(shù),，自從采用這項技術(shù)以及后來的40納米濾過技術(shù)之后，我們的血清產(chǎn)品中沒有再發(fā)現(xiàn)有支原體的污染,，也是使得熱滅活成為不必要的另外一個原因,。

人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSC）培養(yǎng)體系

iPS細(xì)胞培養(yǎng)添加劑（配套）

iPS細(xì)胞消化液（相關(guān)1）

matrix基質(zhì)膠（相關(guān)2）

iPS細(xì)胞專用因子Y27632（相關(guān)3）

H9人類胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)體系

H9細(xì)胞培養(yǎng)添加劑（配套）

H9細(xì)胞消化液（相關(guān)1）

matrix基質(zhì)膠（相關(guān)2）

H9細(xì)胞專用因子Y27632（相關(guān)3）

H1人類胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)體系

H1細(xì)胞培養(yǎng)添加劑（配套）

H1細(xì)胞消化液（相關(guān)1）

matrix基質(zhì)膠（相關(guān)2）

H1細(xì)胞專用因子Y27632（相關(guān)3）

干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒（培養(yǎng)體系）

干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化試劑盒（培養(yǎng)體系）

干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)分化試劑盒（培養(yǎng)體系）

原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代成纖維細(xì)胞無血清培養(yǎng)基

原代平滑肌細(xì)胞低血清培養(yǎng)體系

原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代肝實質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代星狀細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代巨噬細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代間充干細(xì)胞無血清培養(yǎng)體系

原代間充干細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代周細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代雪旺細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代黑色素細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代成骨細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代軟骨細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代肥大細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代樹突狀（DC)細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代破骨細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代NK細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代精原細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代內(nèi)膜細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系

原代CIK細(xì)胞培養(yǎng)體系

胚胎發(fā)育與熱滅活

熱滅活胎牛血清（FBS500-WH-002）

Pinyopummintr等證明血清去除滅活步驟不影響牛胚胎的發(fā)育分化；有研究結(jié)果證實熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對細(xì)胞的促粘附作用,，在用SV-BHK,、BALB-3T3、CV－1,、FS-4細(xì)胞對細(xì)胞粘附實驗中,，熱滅活對胎牛血清的影響小于對小牛血清的影響。

細(xì)胞株生長與熱滅活

我們調(diào)查了熱滅活對胎牛血清以及對其中不同細(xì)胞株生長能力的影響,。通過比較11個不同細(xì)胞株,，發(fā)現(xiàn)其中熱滅活對6個細(xì)胞株（HBAE，MDBK,，Vero,，成纖維細(xì)胞，MRC-5）的生長帶來負(fù)面影響,，三個細(xì)胞株（FOX-NY,，MDCK和CHO-K1）不受熱滅活的影響，而只有兩個細(xì)胞株（Balb/3T3,，Sp2/0Ag14 hybrid）,，在熱滅活之后，細(xì)胞生長有輕微的改善,。所以,，在正常的操作下，熱滅活通常對細(xì)胞的生長沒有明顯的促進(jìn)作用,。

沉淀與熱滅活

在正常操作下,，熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來負(fù)面的影響，對血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生,，而導(dǎo)致的沉淀又常常被認(rèn)為是微生物的污染。注意到這個現(xiàn)象之后,，為了驗證污染的存在,，或者促進(jìn)沉淀的溶解,，許多培養(yǎng)者往往將血清放置37℃溫育。這卻往往使情況變得更糟,，血清中的蛋白進(jìn)一步的析出,，為了確信血清未被污染，進(jìn)行的鏡檢,，無菌培養(yǎng)試驗,，和革蘭氏染色試驗更是浪費了實驗者大量的時間和精力。

結(jié)論

總之,，多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的,。很多場合下，熱滅活并不會改善細(xì)胞的生長,，卻降低了支持細(xì)胞生長的能力,。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下，其促進(jìn)的比率也是微不足道的,。另外,，血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物的污染，從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩,。我們建議,，對于那些對血清進(jìn)行滅活的用戶，需要通過試驗來證實其必要性,，確定滅活的適當(dāng)條件,；在滅活過程中，需要嚴(yán)格認(rèn)真監(jiān)測,，并選擇一個可重復(fù)的方案進(jìn)行操作,。