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魚雌激素E ELISA試劑盒

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魚類甲狀腺素(T4) ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知待測(cè)物質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),。先將待測(cè)物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育,。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP,。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A,、B,,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系,。

魚雌激素E ELISA試劑盒?  自備材料
1)蒸餾水。
2)加樣器:5ul,、10ul,、50ul、100ul,、200ul,、500ul、1000ul,。
3)振蕩器及磁力攪拌器等,。

魚類甲狀腺素(T4) ELISA試劑盒安全性
1)避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2)實(shí)驗(yàn)中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品。
3)不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。

魚類甲狀腺素(T4) ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9)按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。

魚類甲狀腺素(T4) ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2)血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè),。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

魚類甲狀腺素(T4) ELISA試劑盒試劑的準(zhǔn)備
1)標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,,不能儲(chǔ)存,。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。
2)洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋,。

魚類甲狀腺素(T4) ELISA試劑盒操作步驟
1)使用前,,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時(shí),。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
6)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A,、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
8)取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果,。
9)在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

魚類甲狀腺素(T4) ELISA試劑盒局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到精確的結(jié)果,。

魚類甲狀腺素(T4) ELISA試劑盒試劑盒性能
1. 靈敏度:小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%,。

魚類甲狀腺素(T4) ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析
1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2,、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),,相應(yīng)的待測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,,樣品的待測(cè)物質(zhì)含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,。

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