羊階段特異性表面抗原-1(SSEA-1)ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知待測物質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測,。先將待測物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,,加入親和素標(biāo)記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,,然后加入底物A、B,,和酶結(jié)合物同時(shí)作用,。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系,。
羊階段特異性表面抗原-1(SSEA-1)ELISA試劑盒自備材料
1)蒸餾水,。
2)加樣器:5ul、10ul,、50ul,、100ul、200ul,、500ul,、1000ul。
3)振蕩器及磁力攪拌器等,。
羊階段特異性表面抗原-1(SSEA-1)ELISA試劑盒安全性
1)避免直接接觸終止液和底物A,、B。一旦接觸到這些液體,,請盡快用水沖洗,。
2)實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品,。
3)不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
羊階段特異性表面抗原-1(SSEA-1)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
9)按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
羊階段特異性表面抗原-1(SSEA-1)ELISA試劑盒樣品收集,、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。