細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)死亡的原因及解決方法,？

可能原因： 1,、培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2,； 2,、培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大； 3,、細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷,； 4、培養(yǎng)液滲透壓不正確,； 5,、培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積 。 解決方法： 1,、檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2,； 2、檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度,； 3,、取新的保存細(xì)胞種； 4,、檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓,； 5、換入新鮮培養(yǎng)液,。

細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)不好的原因及解決方法,？

可能原因： 1、細(xì)胞本身的狀態(tài) 細(xì)胞傳代次數(shù)多,，細(xì)胞老化,； 細(xì)胞的接種量：接種量過低,，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢； 細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒,，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng),； 胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡,；時(shí)間過短,，細(xì)胞未wan全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡,； 細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融,。 2、污染 支原體污染,； 霉菌污染,。 3,、培養(yǎng)基或血清 更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證,； 選擇的培養(yǎng)基是否合適； 培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤,。 4,、培養(yǎng)環(huán)境 CO2供應(yīng)是否正常； 培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確,。 解決方法： 根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因,，做出針對(duì)性的。解決方案 1,、注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù),、接種量等； 2,、避免產(chǎn)生污染（用正規(guī),、合法、可溯源的血清）,； 3,、要用合適的血清或培養(yǎng)基，最好經(jīng)過驗(yàn)證,； 4,、注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境。

細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)緩慢的原因及解決方法,？

1,、由于更換不同培養(yǎng)液或血清； 2,、培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子耗盡或缺乏或已被破壞,； 3,、培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染； 4,、試劑保存不當(dāng),； 5、接種細(xì)胞起始濃度太低,； 6,、細(xì)胞已老化； 7,、支原體污染 ,。 解決方法： 1、比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,，比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn),，讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液； 2,、換入新鮮配置培養(yǎng)液,，或補(bǔ)加谷氨酰胺及生長(zhǎng)因子； 3,、用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),，如發(fā)現(xiàn)污染，丟棄培養(yǎng)物,； 4,、血清需保存在-10到-20℃。培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存,。含血清wan全培養(yǎng)液在2-8℃保存,，需在1周內(nèi)用完； 1,、增加接種細(xì)胞起始濃度,； 2、換用新的保種細(xì)胞,； 3,、分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體,。清潔支架和培養(yǎng)箱,。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物,。

懸浮細(xì)胞成簇或者成團(tuán)的原因及解決方法?

可能原因： 1,、培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子 ； 2,、支原體污染,； 3、蛋白酶過度消化使得細(xì)胞裂解,； 4,、DNA污染 。 解決方法： 1,、用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細(xì)胞,，輕巧吹吸細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液； 2,、分離培養(yǎng)物,，檢測(cè)支原體； 3,、用DNaseI處理細(xì)胞,。