細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)死亡的原因及解決方法,？

可能原因： 1,、培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2； 2,、培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大,； 3、細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷,； 4,、培養(yǎng)液滲透壓不正確； 5,、培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積 ,。 解決方法： 1,、檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2； 2,、檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度,； 3、取新的保存細(xì)胞種,； 4,、檢測培養(yǎng)液滲透壓； 5,、換入新鮮培養(yǎng)液,。

細(xì)胞培養(yǎng)生長不好的原因及解決方法？

可能原因： 1,、細(xì)胞本身的狀態(tài) 細(xì)胞傳代次數(shù)多,，細(xì)胞老化； 細(xì)胞的接種量：接種量過低,，細(xì)胞生長緩慢,； 細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長,； 胰酶消化時間過長或過短：時間過長,，細(xì)胞死亡；時間過短,，細(xì)胞未wan全分離而成團，細(xì)胞死亡,； 細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融,。 2、污染 支原體污染,； 霉菌污染,。 3、培養(yǎng)基或血清 更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗證,； 選擇的培養(yǎng)基是否合適,； 培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤。 4,、培養(yǎng)環(huán)境 CO2供應(yīng)是否正常,； 培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確。 解決方法： 根據(jù)以上四個方面的可能原因,，做出針對性的,。解決方案 1、注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù),、接種量等,； 2,、避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法,、可溯源的血清）,； 3、要用合適的血清或培養(yǎng)基,，最好經(jīng)過驗證,； 4、注意實驗室的環(huán)境,。

細(xì)胞培養(yǎng)生長緩慢的原因及解決方法,？

1、由于更換不同培養(yǎng)液或血清,； 2,、培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞； 3,、培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染,； 4、試劑保存不當(dāng),； 5,、接種細(xì)胞起始濃度太低； 6,、細(xì)胞已老化,； 7、支原體污染 ,。 解決方法： 1,、比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長實驗,，讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液,； 2、換入新鮮配置培養(yǎng)液,，或補加谷氨酰胺及生長因子,； 3、用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),，如發(fā)現(xiàn)污染,，丟棄培養(yǎng)物； 4,、血清需保存在-10到-20℃,。培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清wan全培養(yǎng)液在2-8℃保存，需在1周內(nèi)用完,； 1,、增加接種細(xì)胞起始濃度； 2,、換用新的保種細(xì)胞,； 3、分離培養(yǎng)物,，檢測支原體,。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,，丟棄培養(yǎng)物,。

懸浮細(xì)胞成簇或者成團的原因及解決方法?

可能原因： 1、培養(yǎng)液中含鈣,、鎂離子 ,； 2、支原體污染,； 3,、蛋白酶過度消化使得細(xì)胞裂解； 4,、DNA污染 ,。 解決方法： 1、用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細(xì)胞,，輕巧吹吸細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液,； 2、分離培養(yǎng)物,，檢測支原體,； 3、用DNaseI處理細(xì)胞,。