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細(xì)胞名稱:A549/DDP,,人肺癌順鉑耐藥株
備注:千舍細(xì)胞庫所有發(fā)出的細(xì)胞,,均含有STR鑒定報告,,售后無憂!
細(xì)胞特性:
安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄,。收到細(xì)胞后,,在倒置鏡下在4X物鏡)觀察整個細(xì)胞生長情況。
(一)如果細(xì)胞未長滿,,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),,嚴(yán)格無菌操作,,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng),。
(二)如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次,。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化,。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,,分到新的培養(yǎng)瓶中,。如果沒有特別說明,收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二,。
注意事項:
1,、觀察細(xì)胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度,??醇?xì)胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。
2,、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3,、有些細(xì)胞貼壁不牢,,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi),。
4,、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細(xì)胞有污染,,請及時與我們。
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