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動物血清的定義以及分類

時間:2023-9-26閱讀:1524
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動物血清的定義:

血清,,指血液凝固后,,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后,,分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿,。血清的主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì),,包括激素、維生素,、轉(zhuǎn)運蛋白,、微量元素、擴散因子和生長因子等細胞增殖和維持的必需成分,,促進細胞生長,。

動物血清的分類:

1、按來源動物分

常見的血清供體動物,,主要有牛,、馬、豬,、兔、雞等。

2,、按照牛的年齡分

市場上常見的牛血清,,根據(jù)采血時間不同和血清采制方法分為:又可以分為胎牛、新生牛,、小牛血清和成年牛血清:胎牛血清(Foetal Bovine Serum,,簡稱FBS):5-8月未出生胎牛,人工引產(chǎn)胎牛心臟穿刺取血,;新生牛血清(Newborn Calf Serum,,簡稱NBCS):出生14小時內(nèi)未進食的新生牛,通常采用頸動脈采集血液分離得到的血清,;小牛血清(Calf Serum):出生后1-12月齡小牛動脈采血分離血清,;成年牛血清(Adult Bovine Serum,簡稱ABS):一歲以上成年牛,,屠宰時收集全血后分離得到血清,。

 

以上取血牛齡的差異主要是受當?shù)貒倚竽翗I(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響,因為牛血多為畜牧業(yè)副產(chǎn)業(yè),,并未有專門為取血而養(yǎng)的牛,。不同牛齡血清所含的促細胞生長因子、促貼附因子,、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同,。常規(guī)來說,年齡越小的牛血清,,細胞培養(yǎng)效果越好,。其中胎牛由于還未接觸外界,血液中所含抗體,、補體等對細胞生長有害的成分最少,,血清的質(zhì)量高。根據(jù)血清質(zhì)量從優(yōu)到次排序依次為,,胎牛>新生牛>小牛>成年牛,。所以目前多數(shù)科研人員選擇胎牛血清進行細胞培養(yǎng)。

3,、按照采集地點分

根據(jù)血源采集地不同,,大致又可以分為澳洲、北美,、南美及中國四大類,。

 

從血源質(zhì)量、加工工藝,、質(zhì)控上區(qū)分,,從優(yōu)到次排序依次是澳洲>北美>南美>國產(chǎn),。特別是生產(chǎn)過程中,澳洲和北美大多采用靜置分層工藝,,對紅細胞破壞小,,血清中的血紅蛋白和膽紅素較少,顏色呈透明的淡黃色,;而南美則大多采用離心收集工藝,,紅細胞破壞較多,血清中血紅蛋白和膽紅素較多,,顏色偏紅,。

根據(jù)不同品質(zhì)分:

區(qū)分胎牛血清很重要的一點就是血清的內(nèi)毒素含量,內(nèi)毒素含量越低的血清,,級別就越高,,以胎牛血清為例:當血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清,;當血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml,,≤ 25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清,;當血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時,,此血清為標準級胎牛血清;目前,,由于同一廠家,,不同批次的血清,內(nèi)毒素數(shù)值也可能有較大差異,,因此很多血清廠家在名稱上已不注明級別,。但使用者仍可通過檢測報告進行甄別。

根據(jù)不同處理分:

透析胎牛血清:透析過濾去除10kD以下小分子(如次黃嘌呤和胸腺核苷),,避免外源小分子對細胞產(chǎn)生干擾,。適合脈沖示蹤實驗(例如同位素標記特定小分子加入到培養(yǎng)體系中,以研究細胞代謝),,也適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選等應(yīng)用,。去外泌體血清:通過超速離心法去除絕大部分外泌體的血清,適用于外泌體相關(guān)細胞實驗研究,。超低lgG的血清:使用親和層析等工藝,,去除IgG,使其水平低于標準值,,適用于抗體,、病毒和病毒反應(yīng)以及細胞表面抗原表位相關(guān)研究?;钚蕴?葡聚糖處理的血清:可降低血清中類固醇激素的濃度,,例如雌二醇,、孕酮、皮質(zhì)醇,、睪酮,、T3 和 T4。適用于相關(guān)激素研究的實驗,。

其他動物源血清:

馬血清:一般分為兩種:第一種馬血清含有的大分子蛋白比較多,適用于蛋白封閉,;第二種馬血清為細胞培養(yǎng)級別,。經(jīng)過多次過濾,去除大多數(shù)大分子蛋白,,但保留了血清中促細胞生長的活性因子,,適用于細胞培養(yǎng),例如神經(jīng)細胞培養(yǎng)時,,培養(yǎng)基中需要添加馬血清,。豬血清:常用于豬肺炎支原體疫苗的生產(chǎn)。在對細胞和活疫苗進行支原體檢驗中,,《獸藥典》明確推薦豬血清作為支原體檢驗用液體培養(yǎng)基的組成成分,。兔血清:兔血清通常從六個月或更小的動物身上收集,可用于免疫細胞化學(xué)和免疫組織化學(xué)中的封閉血清,。羊血清:多用做封閉液,,也有一些研究人員發(fā)現(xiàn),優(yōu)質(zhì)的羊血清可用于某些細胞的培養(yǎng),。雞血清:從屠宰供人類食用的健康雞中收集的,。有研究用于血清維生素 B12 的放射性同位素稀釋測定。


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