一,、透析胎牛血清的生產(chǎn)工藝

1,、透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎(chǔ)上進行加工的,。
胎牛血清在無菌條件下要經(jīng)過多重過濾,，進行一系列的檢測：

理化性質(zhì)檢查（如滲透壓和pH值）

成分檢查（如內(nèi)毒素和血紅蛋白）

外源因子檢查（如細菌,、病毒和支原體）

促進細胞增殖的檢查等

透析胎牛血清為保證其性能和安全性，也需具備胎牛血清的這些工藝和檢查,。

2,、透析胎牛血清，需經(jīng)過透析處理,。

在4°C下用特定的透析膜對血清在0.15M NaCl中透析,。由于該透析膜只允許10 kDa以下的小分子穿過，在滲透壓的作用下,，這些小分子便從血清中滲析到透析膜外的NaCl溶液中,。10 kDa以下的小分子有化學(xué)小分子、核苷酸,、某些激素,、鹽、低分子量蛋白質(zhì),、氨基酸,、細胞因子、葡萄糖,、殘留抗生素和其他外源分子,。

那么透析的效果如何？以及透析到何時呢,？

由于不可能監(jiān)測全部小分子,，因此常選用葡萄糖為代表。血清中葡萄糖<5 mg/dL,，即可以停止透析了,。透析過程中，除監(jiān)測葡萄糖濃度外（可采用葡萄糖氧化酶方法測定）,，還需仔細監(jiān)測pH值和滲透壓,。

3,、該透析一般采用切向流過濾（tangential flow filtration）。

也就是液體流動方向與過濾方向呈垂直方向的過濾形式,。該方式使液體流動在濾膜表面產(chǎn)生剪切力,，減小了濾膜上的物質(zhì)堆積，保證了穩(wěn)定的過濾速度,。

透析胎牛血清

二,、 透析胎牛血清的應(yīng)用

透析胎牛血清主要用于可能需要關(guān)注小分子濃度的特殊研究。這主要包括四個領(lǐng)域,，其中有些領(lǐng)域是相互交叉的,，透析胎牛血清應(yīng)用廣泛，以下僅稍作舉例,。

蛋白質(zhì)組學(xué)

同位素標記

細胞通訊

報告基因細胞系的篩選

1,、 細胞培養(yǎng)條件下穩(wěn)定同位素標記技術(shù)（簡稱SILAC）。
這是一項以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),，全稱為Stable isotope labeling with amino acids in cell culture (SILAC),。它將13C或15N標記的氨基酸摻入到培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞，來標記細胞內(nèi)新合成的蛋白質(zhì),，一般培養(yǎng)5-6代,，細胞中的蛋白質(zhì)將都被同位素標記,。然后質(zhì)譜分析,，即可比較經(jīng)過不同處理的細胞,，其內(nèi)部蛋白質(zhì)豐度的變化。它還可用于正常細胞與病理狀態(tài)細胞二者的比較,。為避免胎牛血清中天然氨基酸的干擾,，這時就需要用到透析胎牛血清，以保證摻入細胞蛋白中的氨基酸均為標記氨基酸（常采用賴氨酸或精氨酸）,。

2,、工程細胞株的篩選。
以常見的工程細胞株CHO-DFGRˉ為例,，該細胞自身缺乏二氫葉酸還原酶（DHFR）,，必須在添加了次嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸的培養(yǎng)液中才能得以存活,。如將含有目的基因與DHFR基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞,，則可以得到在不含上述添加劑的培養(yǎng)基上也能生長的細胞克隆。通過甲氨蝶呤（MTX）進一步篩選,，可進一步得到能表達大量目的蛋白的細胞克隆,。這時的胎牛血清由于不含有次嘌呤和胸腺嘧啶等，也常作為選擇培養(yǎng)基的一部分，參與陽性轉(zhuǎn)染細胞克隆的篩選,。
3、研究某些因子如核苷酸或微量元素如硒,、鋅對某種類型細胞增殖,、分化的影響。
這時也需要用透析胎牛血清,，以避免培養(yǎng)體系中天然存在的這些物質(zhì)的干擾,。