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告客戶書:買來的WinSera血清需要過濾嗎,?
WinSera血清使用前是否需要過濾?
本公司血清在ISO 13485認(rèn)證的廠房中生產(chǎn),,經(jīng)過3次0.1 μm過濾,,出廠經(jīng)過檢測并且會使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測試及無菌檢測,污染幾率非常非常非常低(重要的事情說三遍),。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性,,根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測,結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染,。
因此買來的血清不需要再次進(jìn)行過濾,。
幾種血清的比較:
項(xiàng)目 | 等級 |
提取血清體積/只牛 | 成年牛血清(5-8L) > 小牛血清 (2L) > 國產(chǎn)胎牛血清 (1L) > 胎牛血清 (0.5L) |
培養(yǎng)細(xì)胞的效果 | 胎牛血清 > 國產(chǎn)胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清 |
價(jià)格 | 胎牛血清 > 國產(chǎn)胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清 |
這幾種不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長因子,、促貼附因子,、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同,。常規(guī)來說,年齡越小的牛血清,,細(xì)胞培養(yǎng)效果越好,。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛,且因?yàn)樘ヅN催M(jìn)食過母乳,,所以IgG含量低,。故目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
胎牛血清成分已知的已有上千多種,,以下為主要成分表:
成分 | 濃度 | 成分 | 濃度 |
蛋白和多肽 | - | 磷脂 | 0.7-3.0 mg/ml |
白蛋白 | 20-50mg/ml | 丙酮酸 | 2-10 ug/ml |
胎球蛋白 | 10-20mg/ml | 碳水化合物 | - |
纖連蛋白 | 1-10 ug/ml | 葡萄糖 | 0.6-1.2 mg/ml |
球蛋白 | 1-15 mg/ml | 乳酸 | 0.5-2.0 mg/ml |
α-抗胰蛋白酶 | 0.5-2.5 mg/ml | 多胺 | - |
轉(zhuǎn)鐵蛋白 | 2-4 mg/ml | 丁二胺,亞精胺 | 0.1-1.0 uM |
生長因子 | - | 尿素 | 170-300 ug/ml |
EGF, PDGF, IGF-I, IL-1 | 1-100 ng/ml | 無機(jī)物 | - |
氨基酸 | 0.01-1.0 uM | 鈣,,氯化物,鉀,,磷 | - |
脂質(zhì) | - | 激素 | - |
膽固醇 | 10 uM | 胰島素 | 1-100 ng/ml |
脂肪酸 | 0.1-1.0 uM | 皮質(zhì)醇 | 10-200 nM |
亞油酸 | 0.01-0.1 uM | 維生素 | 10 ng-10 ug/ml |
導(dǎo)致細(xì)胞污染的原因主要有以下幾方面:
環(huán)境:水浴鍋,、培養(yǎng)箱水盤、細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)壁,、超凈臺,、桌面及試劑瓶身、細(xì)胞房空氣消毒,。
操作:細(xì)胞復(fù)蘇,、傳代、凍存等過程中也可帶入污染,。
試劑:血清,、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、胰酶,、輔助試劑,、營養(yǎng)添加物等。
耗材:培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶,、槍頭,。
細(xì)胞本身:本身攜帶污染、細(xì)胞老化,、分化等,。
WINSERA®胎牛血清 | 貨號 | 規(guī)格 | 庫存狀態(tài) |
優(yōu)級 | FBS500-WS-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
特級 | FBS500-WP-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
ES級別 | FBS500-WE-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
無外泌體血清 | FBS050-EXO | 50ML | 現(xiàn)貨 |
如何進(jìn)行污染源排查?
血清:其他試劑保持不變,,僅更換血清,。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:其他試劑保持不變,僅更換基礎(chǔ)培養(yǎng)基,。
PBS:其他試劑保持不變,,僅更換PBS,。
胰酶:若細(xì)胞復(fù)蘇的很好,一傳代就污染,,可以嘗試其他試劑保持不變,,更換消化用胰酶,看細(xì)胞狀態(tài),。
細(xì)胞反復(fù)復(fù)蘇都會出現(xiàn)污染,,那可保持培養(yǎng)體系不變,培養(yǎng)其他類型且適用于此培養(yǎng)體系的細(xì)胞,,觀察是否有污染出現(xiàn),。整個營養(yǎng)體系:基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清,、營養(yǎng)添加物都可使用控制變量法進(jìn)行排查,。
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