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WINSERA胎牛血清為什么要熱滅活血清?有必要做熱滅活嗎?

時間:2022-6-13閱讀:1656
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WINSERA胎牛血清為什么要熱滅活血清?有必要做熱滅活嗎?


加熱可以滅活血清中的補體系統(tǒng),,使補體去活化,。通常未滅活的補體能夠刺激平滑肌收縮、肥大細胞和血小板組胺的釋放,、激活淋巴細胞和巨噬細胞,,同時還能夠參與溶解細胞的過程。


諸多研究表明大多數(shù)細胞的培養(yǎng)無須進行血清的熱滅活,;而在免疫學研究和ES細胞,、昆蟲細胞、平滑肌細胞的培養(yǎng)過程中,,推薦使用熱滅活血清,。實驗顯示,經(jīng)正確熱滅活處理的血清,,對細胞的生長只有微小的促進或*沒有促進作用,,而通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,造成細胞生長速率降低,。并且熱處理過的血清,,沉淀物明顯增多,倒置顯微鏡下觀察呈“小黑點",,往往會使研究者誤以為是血清受到了污染,,而把血清放于37℃中,沉淀物又會更增多,,有會使研究者誤認為是微生物的分裂增殖,。因此我們建議若非必須,可以不進行熱處理,,既節(jié)省時間又確保質(zhì)量,。


熱滅活方法?

加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,,細胞和血小板釋放組胺,,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,,培養(yǎng) ES 細胞,、平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清,。若必須做血清的熱滅活,,請遵守56 ℃,30 分鐘的原則,,并且隨時搖晃均勻,。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,,可以無須做此步驟,。

1. 用上述描述的方法將血清在低溫冰箱或室溫下解凍。
2. 在血清解凍時,,將一個容器裝入適量的水,,用于模擬裝有血清瓶子在熱處理過程中檢測瓶內(nèi)水的溫度。容器大小,、質(zhì)地和裝水的量最好與裝血清的瓶子相同或相似,。
3. 待血清*解凍時,將含有血清的瓶子放在預熱的 56 ℃水浴里,,不要將含有血清的瓶子讓水淹沒或接近瓶子的蓋子,,以免導致污染。
4. 在開始加熱處理時,,要及時使用溫度計測定模擬瓶內(nèi)水的溫度,。
5. 在預熱期間,每隔 3-5 分鐘要適當搖晃含有血清和水的瓶子,,確保瓶內(nèi)液體均勻加熱,。6. 一旦模擬瓶內(nèi)的水溫達到 55.8± 0.5 ℃時,開始計時,,并在此溫度范圍內(nèi)熱處理 30 分鐘,,然后立即放在冰上冷卻。

為防止在熱處理過程中由蛋白質(zhì)變性而導致的渾濁和沉淀現(xiàn)象,,熱處理時應注意下列事項:

  1. 不要用高于 25 ℃ 以上的溫度加快解凍速度,。
    2. 在熱處理之前,要使血清*融解,。
    3. 不要使熱處理的溫度高于 56.3 ℃
    4. 熱處理時間不要長于 30 分鐘,。
    5. 在加熱過程中一定要定時搖動血清。







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