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未拆封的血清,,一般情況下應存放于-10℃至-20℃,,在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用,,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi),,再放回冷凍,。
將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,,然后在室溫下使之全融,,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻,。*溶解后建議盡快使用,,若長時間儲存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素,、纖維蛋白原,、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。
總結(jié):血清推薦在-10至-20℃條件儲存,,并避免反復凍融,。
◆ 解凍時,,請隨時將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一;
◇分裝凍存時,,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),;
◆ 切勿由-20℃直接至37℃水浴鍋解凍,,較大的溫差,易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,;
◇切勿將血清置于37℃過長時間,,否則可能使之渾濁,,其中一些不穩(wěn)定的組分也會因此受到影響,,最終降低血清的品質(zhì);
◆ 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,,若非必要,可以無須做此步驟,;
◇若必須做血清的熱滅活,,請遵守56℃,,30分鐘的原則,,并且保持搖晃均勻。溫度過高,、時間過久或搖晃不均勻,,都會造成沉淀物的增多。
在細胞培養(yǎng)的時候,有時會在400倍顯微鏡下看到小黑點在動,,小黑點有時呈點狀,,有時呈小的片狀,運動形式為在原地振動,,類似布朗運動,,這種小黑點既不是細菌、霉菌,,也不是支原體,,目前業(yè)內(nèi)人士稱其為“黑膠蟲"。
黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物,,本身就存在爭議,。黑膠蟲一般是存在血清里的,而血清通常是經(jīng)過0.1μm濾膜過濾的,,所以血清里不可能存在細菌,、霉菌及支原體等微生物。如果說黑膠蟲不是生物,,它會不斷增多,,達到一定數(shù)量時會與細胞競爭性生長,與細胞競爭培養(yǎng)基中的營養(yǎng),,從而使得細胞營養(yǎng)不足而死亡,。
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