1,、查找待測樣本的蛋白濃度

　　可以通過NCBI的文獻，給出的蛋白表達量參考值來比較elisa試劑盒給出的樣本值與報道值是否一致,。

2,、試劑盒的應用種屬、檢測樣本的種類

　　除試劑盒特別說明外,，一般不同種屬不能通用,。常見待測樣本種類有：血清和血漿（不同抗凝劑），細胞上清,，和細胞裂解液，試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用,。

3,、•.檢測范圍：

  •建立線性范圍：需測定9-11個濃度水平,，每個濃度水平重復測定3-4次。

•驗證標稱線性參數：需測定4-6個濃度水平,，每個濃度水平重復測定3-4次,。

•所有樣本應在一次運行中或幾次間隔很短的運行中隨機測定，最好在一天之內完成,。