胎牛血清注意事項(xiàng)

如果不能短期內(nèi)使用完畢,，解凍后請(qǐng)適當(dāng)分裝,。血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,，因此在分裝血清時(shí)須使分裝瓶預(yù)留一定體積空間,，否則易導(dǎo)致分裝瓶?jī)隽讯l(fā)生污染,。
熱滅活是指56℃,，30分鐘加熱已*解凍的血清,。加熱過(guò)程中需有規(guī)則地?fù)u晃均勻。熱處理的目的是滅活血清中的補(bǔ)體(complement),。除非必須,，一般不推薦對(duì)血清進(jìn)行熱處理。因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多,，而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量,。補(bǔ)體參與的反應(yīng)有：細(xì)胞毒作用、平滑肌細(xì)胞收縮,、肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺,、增強(qiáng)吞噬作用、促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化等,。
瓶裝血清解凍需采用緩慢解凍法：把在-15 ~ -40℃低溫冰箱中保存的血清放入4℃冰箱中解凍約1天,，待全部解凍后再分裝。在解凍過(guò)程中每隔約2小時(shí)可輕輕搖晃均勻(盡量避免產(chǎn)生氣泡),，使溫度與成分均一,，減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃或更低 溫度進(jìn)入37℃水浴解凍,，這樣因溫度改變太大,，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀，從而使用血清的質(zhì)量下降,。
血清中的絮狀沉淀物主要是解凍后血清中纖維蛋白及4℃長(zhǎng)時(shí)間保存后血清中的脂蛋白變性造成的,，這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量，可不用處理,。如果必須要處理,，可400g離心5分鐘去除。但不宜過(guò)濾去除,，因?yàn)樾鯛钗锟赡茏枞麨V膜,。
經(jīng)過(guò)熱處理的血清中沉淀物會(huì)顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察像“小黑點(diǎn)",，而且由于這些“小黑點(diǎn)"的布朗運(yùn)動(dòng)在顯微鏡下被放大,，感覺(jué)是在游動(dòng)，所以經(jīng)常被誤認(rèn)為血清被微生物污染,。通常這些小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),，但如果懷疑血清存在微生物污染，則應(yīng)立即停止使用,，更換另一批次的血清,。可將適量血清用培養(yǎng)液稀釋至10%濃度后培養(yǎng)1-3天,，觀察小黑點(diǎn)是否急劇增多,，或取適量血清在LB平板上涂板培養(yǎng)觀察是否產(chǎn)生菌落,，以確定是否存在微生物污染。
請(qǐng)勿將血清在37℃放置過(guò)長(zhǎng)時(shí)間,，否則血清會(huì)逐漸變渾濁,，同時(shí)血清中的有效成分也會(huì)逐漸失活而影響血清質(zhì)量。
為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。