如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理,？

原則上：直接滅菌后丟棄之,。

當(dāng)重要的培養(yǎng)污染時，研究者可能試圖消除或控制污染,。首先,，確定污染物是細(xì)菌、真菌,、支原體或酵母,，把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開，用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,，檢查HEPA過濾器,。
高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細(xì)胞系有毒性，因而,，做劑量反應(yīng)實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平,。這點在使用抗生素如霉素b和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟,。

1.在無抗生素的培養(yǎng)基中消化,、計數(shù)和稀釋細(xì)胞，稀釋到常規(guī)細(xì)胞傳代的濃度,。

2.分散細(xì)胞懸液到多孔培養(yǎng)板中,，或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi),，把選擇抗生素加入到每一個孔中,。例如，霉素b推薦下列濃度,，0.25,，0.50，1.0,，2.0,，4.0,8.0 mg/ml,。

3.每天觀測細(xì)胞毒性指標(biāo)，如脫落,，出現(xiàn)空泡,，匯合度下降和變圓。

4.確定抗生素毒性水平后,，使用低于毒性濃度2～3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞2～3代,。

5.在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞一代。

6.重復(fù)步驟4,。

7.在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4～6代,，確定污染是否以已被消除。