如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),，應(yīng)如何處理？

原則上：直接滅菌后丟棄之,。

當(dāng)重要的培養(yǎng)污染時(shí),，研究者可能試圖消除或控制污染。首先,，確定污染物是細(xì)菌,、真菌、支原體或酵母,，把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開,，用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái)，檢查HEPA過濾器,。
高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對(duì)一些細(xì)胞系有毒性,，因而，做劑量反應(yīng)實(shí)驗(yàn)確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平,。這點(diǎn)在使用抗生素如霉素b和抗霉菌素如泰樂菌素時(shí)尤其重要,。下面是推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實(shí)驗(yàn)步驟。

1.在無抗生素的培養(yǎng)基中消化,、計(jì)數(shù)和稀釋細(xì)胞,，稀釋到常規(guī)細(xì)胞傳代的濃度。

2.分散細(xì)胞懸液到多孔培養(yǎng)板中,，或幾個(gè)小培養(yǎng)瓶中,。在一個(gè)濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生素加入到每一個(gè)孔中。例如,，霉素b推薦下列濃度,，0.25，0.50,，1.0,，2.0，4.0,8.0 mg/ml,。

3.每天觀測(cè)細(xì)胞毒性指標(biāo),，如脫落，出現(xiàn)空泡,，匯合度下降和變圓,。

4.確定抗生素毒性水平后，使用低于毒性濃度2～3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞2～3代,。

5.在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞一代,。

6.重復(fù)步驟4。

7.在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4～6代,，確定污染是否以已被消除,。