樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液,，用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,，使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞,，用手指把細胞用力彈散,。按照 6 孔板每孔細胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多，必需分裝成50-100萬細胞/管，然后再裂解,。

c)對于組織樣品： 把組織剪切成細小的碎片,。按照每20mg組織加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當減少裂解液的用量)。

用玻璃勻漿器勻漿,，直至充分裂解,。

2、后處理：

將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘,，取上清,，即可進行后續(xù)的ELISA、Western和免疫沉淀等操作,。