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細(xì)胞胞質(zhì)疏松,,狀態(tài)不好,,養(yǎng)不起來,,怎么辦?
策略 1:一般情況下,從血清下手就行,,要么換好血清,,要么提高血清濃度,血清濃度提高到 15%~20% 培養(yǎng) 48 h,,換成正常 10% 的濃度,,用高濃度的血清培養(yǎng)時間過長對細(xì)胞有毒性。
策略 2:血清下手之后可以同時采取提高細(xì)胞密度的方法,,從培養(yǎng)瓶換到六孔板,,12 孔板等,細(xì)胞密度大,,細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子多,,腫瘤細(xì)胞通過旁分泌途徑促進(jìn)細(xì)胞生長。
預(yù)防策略:細(xì)胞胞質(zhì)疏松,,老化的原因在于細(xì)胞傳代次數(shù)比較多,,胰酶消化時間太長,這時候,,一定要控制細(xì)胞傳代次數(shù),,注意胰酶消化時間,胰酶消化時間過長,,容易導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)不佳以及胞質(zhì)疏松,。有一招,元元沒試過,,可以嘗試,,將細(xì)胞凍起來,過段時間復(fù)蘇,,細(xì)胞會長得比較好,。
長途運(yùn)輸過來裝滿培養(yǎng)液的細(xì)胞如何處理?
很多人都會遇到從其他地方買來細(xì)胞或者快遞運(yùn)來細(xì)胞,裝滿培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶的細(xì)胞怎么處理的問題,。
第 1 步:先放 37℃ 培養(yǎng)箱放置 4 小時,,這樣細(xì)胞在通過長途跋涉以后得以穩(wěn)定,觀察細(xì)胞狀態(tài),。
第 2 步:將新鮮培養(yǎng)基和舊的培養(yǎng)基 1:1 稀釋,,如果細(xì)胞狀態(tài)不好,可以將血清濃度提到 15%,,否則正常培養(yǎng),,這樣有一個過渡期,不至于細(xì)胞換血清之后狀態(tài)不佳,,15% 的血清培養(yǎng) 48 h 之后換成正常濃度培養(yǎng),。
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一、血清類: 涉及到的血清品牌:SERANA,、GIBCO,、Hyclone、BI,、Bovogen,、Gemini、美國NTC,、biowest,、PAN、SIGMA,、康寧,、PAA……涉及到血清分類:南美源、北美源,、澳洲源,、超低Igg、透析型,、活性炭處理,、高脂、低脂型等,,另外還有無外泌體血清,、科研用人混合血清、AB血清,、馬血清,、小牛血清、驢血清,、雞血清,、兔血清、大鼠血清等
二,、細(xì)胞類: 400多株細(xì)胞,,含STR鑒定及確切來源證明
三、常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)試劑類: Hyclone,、Gibco培養(yǎng)基(液體、干粉),、雙抗,、胰酶、PBS緩沖液,、HAKATA細(xì)胞凍存液
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可以提供免費(fèi)代測服務(wù),、 細(xì)胞因子檢測試劑盒、內(nèi)分泌檢測試劑盒,、肌纖維話檢測試劑盒,、肌梗賽檢測試劑盒、腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒,、自身免疫檢測試劑盒,、染病檢測試劑盒
五、ATCC 細(xì)胞或者培養(yǎng)基代購
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