中檢維康iELisa 黃曲霉毒素總量試劑盒

1. 概要

黃曲霉毒素是黃曲霉和寄生曲霉的有毒的代謝產(chǎn)物,，主要存在于谷物,、堅果和飼料中,。1993年黃曲霉毒素B1被世界衛(wèi)生組織（WHO）的癌癥研究機構劃定為Ⅰ類致癌物，是一類毒性*的劇毒物質,。它被證明對人和動物的肝臟,、腎臟等組織和器官具有很大的危害。中國標準規(guī)定：黃曲霉毒素B1在玉米,、大米,、小麥中*分別不得超過20、10,、5μg/kg,，各種飼料中黃曲霉毒素B1的*為10-50μg/kg。黃曲霉毒素總量試劑盒不僅可以對黃曲霉毒素B1,，而且可以對其他黃曲霉毒素（B2,、G1、G2）進行全面的檢測,。

1. 原理

測定的基礎是抗原-抗體反應,。微孔板上包被有抗抗體。加入黃曲霉毒素標準品或樣品,、酶標抗原和抗體后,，游離的黃曲霉毒素B1、B2,、G1,、G2與酶標抗原競爭結合抗體，抗體或抗體結合物與固定在微孔板上的抗抗體再結合,，沒有結合的標準品,、酶標抗原及抗體被洗去，加入TMB底物顯藍色,，加入終止液后顏色由藍變黃,，用酶標儀在450nm處檢測，吸光值與樣品中黃曲霉毒素總量含量成負相關,，與標準曲線比較即可得出黃曲霉毒素總量的含量,。

1. 試劑盒的組成

1. 包被有抗抗體的96微孔板：1塊（96 孔，12 條×8 孔）
2. AFT 標準品：0 ng/mL,、 0.25ng/mL,、0.5ng/mL、1.0ng/mL,、2.0ng/mL           1 瓶 × 1.0mL
3. AFT酶標抗原：               1 瓶 × 10mL
4. AFT抗體：                   1 瓶 × 10mL
5. 10× 濃縮洗滌液：             1 瓶 × 50mL
6. AFT稀釋緩沖液A：           1 瓶 × 50mL
7. AFT稀釋緩沖液B：           1 瓶 × 50mL
8. 顯色底物TMB：              1 瓶 × 17mL
9. 終止液：                     1 瓶 × 7mL
10. 試劑盒說明書：               1份
11. 質檢報告：                   1份

1. 需要的儀器,、試劑

1）儀器  

1. 酶標儀450nm（iELisa全自動酶標儀或相當者）
2. 微量移液器：20μL-200μL單道，100μL-1000μL單道, 50μL-300μL八道
3. 多功能旋轉混合器（或者搖床、高速均質器）
4. 酶標板振蕩器
5. 渦旋混合器
6. 氮氣吹干儀
7. 50mL離心管
8. 1.5mL離心管
9. 離心機
10. 定性濾紙
11. 過濾漏斗
12. 天平：感量0.01g

1. 試劑

1. 樣品提取液70%甲醇：取700mL甲醇,，加300mL純水,，混勻。
2. 純水（蒸餾水,、去離子水）,、正己烷、三氯甲烷,、甲醇
3. 8.  注意事項
4. 室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫（20- 25℃）會導致數(shù)值偏低,。
5. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥過久的情況，則會出現(xiàn)標準曲線不成線性,，重復性不好的現(xiàn)象,。所以洗板排干后應立即進行下一步操作。
6. 標準物質和顯色液對光敏感,，避免直接暴露在光線下,。
7. 混合要均勻，洗板要*（包括加樣品和標準液的時候都必需充分混合均勻）,。
8. 終止液為強酸性物質,，避免接觸皮膚,。
9. 不要使用過了有效期的試劑盒,，也不要混合使用不同批次的試劑盒，這樣會引起測定結果不準確,。
10. 試劑盒的儲存條件是2-8℃,，切勿冷凍。

11. 9.  中檢維康iELisa 黃曲霉毒素總量試劑盒的性能指標

12. 檢測限LOD: 谷物1.5ppb(μg/kg),，飼料4.0ppb,，植物油1.5ppb(μg/kg)，醬油,、醋1.5ppb(μg/kg),，糕點1.5ppb(μg/kg)，酒類1.5ppb(μg/kg),發(fā)酵液3.5ppb,。（LOD：空白樣品測定值+2倍標準偏差SD）
13. 定量限LOQ: 谷物3.0ppb,，飼料7.5ppb，植物油2.5ppb(μg/kg),，醬油,、醋2.5ppb(μg/kg)，糕點2.5ppb(μg/kg),，酒類3.0ppb,，發(fā)酵液6ppb。
14. 定量檢測范圍：谷物3.0-25ppb，飼料7.5-60ppb,，植物油2.5-20ppb,，醬油、醋2.5-20ppb,，糕點2.5-20ppb,，酒類3.0-25ppb,發(fā)酵液6.0-50ppb。
15.