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GB31658.17-2021多獸殘?zhí)幚矸桨缚晒﹨⒖?/h1>
2022年最新版食品安全抽檢實施細則更新了針對于牛,、羊,、豬、雞的肌肉,、及肝,、腎組織中部分四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類的檢測方法——《GB31658.17-2021動物性食品中四環(huán)素類,、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》,，中檢維康參照該標準進行試驗，并優(yōu)化了部分參數(shù),，建立了一份具有良好回收率及穩(wěn)定性,，能滿足國標要求的 SPE-HPLC-MS/MS 方法，可供參考,。
1.樣品提取
準確稱取粉碎均勻的肉類樣品1g(精確至 0.01 g)于干凈離心管中,，加入8 mL Mcllvaine-Na2EDTA 溶液,，渦旋混勻后超聲提取 20 min，-5℃下 120000 r/min 離心 5 min,，取出上清液于另一干凈離心管,，試樣殘
渣加入 8 mL 磷酸鹽緩沖液，同上述操作,，合并兩次提取液,，-5℃下 120000 r/min 離心 5 min，上清液待凈化,。
Mcllvaine-Na2EDTA 緩沖液：取檸檬酸·一水 12.9g,、磷酸氫二鈉·十二水 10.9g、乙二胺四乙酸二鈉·二水 39.2g,加水 900mL,用 1mol/L 的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) pH 至 5.0±0.2,，用水稀釋至 1000mL。
磷酸鹽緩沖液：取 0.05 mol/L 磷酸二氫鈉溶液 190 mL,用 0.05 mol/L 磷酸氫二鈉溶液稀釋至 1000mL,。
2.樣品凈化
活化：固相萃取柱依次用 5 mL 甲醇和 5 mL 水活化,。（Clover HLB,200mg/6mL）
上樣：取上述待凈化液加入活化好的固相萃取柱中。
淋洗：依次用 5 mL 水,，5 mL 5%甲醇-水溶液,，抽干。
洗脫：用 8 mL 甲醇：乙酸乙酯：氨水=50:50:2 溶液進行洗脫,。
收集全部洗脫液,，45℃下氮吹至 100 μL 左右，加入 0.1%甲酸溶液定容至1mL,過 PTFE 親水濾膜,，上機測試,。
3.基質(zhì)標準曲線溶液的制備
取 6 個空白基質(zhì)樣品同正常樣品一樣操作，收集洗脫液后,，于洗脫液中分別加入適量標液,，再與其他樣品洗脫液一同氮吹，定容,，使最終上機溶液的濃度分別為 2 μg/L,、10 μg/L、50 μg/L,、100 μg/L,、200 μg/L、500 μg/L,。
4.儀器條件
(1)色譜條件
儀器：UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TSQ Endura)
色譜柱：Hypersil GOLD C18 (2.1 mm×100 mm,，1.9 μm)
流動相：A：水(0.1 %甲酸) B：甲醇：乙腈=2:8(0.1 %甲酸)
洗脫方式：梯度洗脫，見表 1
流速：0.3 mL/min
柱溫：35℃
進樣量：10 μL
(2)質(zhì)譜條件
子源：HESI
電噴霧電壓：3500 V
鞘氣壓力：40 arb
輔氣壓力：2 arb
離子傳輸管：380 ℃
輔氣溫度：350 ℃
5.實驗結(jié)果
圖1 添加水平為100.0 μg/kg 時豬肉中獸殘的總離子流圖
圖2 添加水平為100.0 μg/kg 時雞肉中獸殘的總離子流圖
優(yōu)化 Tips：
1.在提取過程中降低離心的溫度至-5℃可以更好的抑制樣品中的脂肪在水溶液表面的分散,，有利于樣品的提取轉(zhuǎn)移,。
2.在超聲提取完合并兩次的提取液之后,，再進行一次離心，更好的去除基質(zhì)的影響,，便于上樣過柱,。
3.在淋洗過程中使用 5 mL 5%甲醇-水溶液淋洗液，可以減少在淋洗過程中部分目標物的損失,。
4.標準中氮吹至 100 μL 左右,，不氮吹干可以減少在氮吹過程中部分目標化合物的損失。
5.復(fù)溶時,，加入 0.1%甲酸溶液定容至 1 mL,可以有效的改善部分目標化合物的峰型,，同時提高部分化合物的回收率。6.為了改善上樣后的流速問題,，使用 Clover ® HLB( 貨號：HLB2006-M)較普通的 HLB 凈化柱可以獲得更好的流速,。
6.訂購信息
2022年最新版食品安全抽檢實施細則更新了針對于牛,、羊,、豬、雞的肌肉,、及肝,、腎組織中部分四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類的檢測方法——《GB31658.17-2021動物性食品中四環(huán)素類,、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》,，中檢維康參照該標準進行試驗，并優(yōu)化了部分參數(shù),，建立了一份具有良好回收率及穩(wěn)定性,，能滿足國標要求的 SPE-HPLC-MS/MS 方法，可供參考,。
1.樣品提取
準確稱取粉碎均勻的肉類樣品1g(精確至 0.01 g)于干凈離心管中,，加入8 mL Mcllvaine-Na2EDTA 溶液,，渦旋混勻后超聲提取 20 min，-5℃下 120000 r/min 離心 5 min,，取出上清液于另一干凈離心管,，試樣殘
渣加入 8 mL 磷酸鹽緩沖液，同上述操作,，合并兩次提取液,，-5℃下 120000 r/min 離心 5 min，上清液待凈化,。
Mcllvaine-Na2EDTA 緩沖液：取檸檬酸·一水 12.9g,、磷酸氫二鈉·十二水 10.9g、乙二胺四乙酸二鈉·二水 39.2g,加水 900mL,用 1mol/L 的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) pH 至 5.0±0.2,，用水稀釋至 1000mL。
磷酸鹽緩沖液：取 0.05 mol/L 磷酸二氫鈉溶液 190 mL,用 0.05 mol/L 磷酸氫二鈉溶液稀釋至 1000mL,。
2.樣品凈化
活化：固相萃取柱依次用 5 mL 甲醇和 5 mL 水活化,。（Clover HLB,200mg/6mL）
上樣：取上述待凈化液加入活化好的固相萃取柱中。
淋洗：依次用 5 mL 水,，5 mL 5%甲醇-水溶液,，抽干。
洗脫：用 8 mL 甲醇：乙酸乙酯：氨水=50:50:2 溶液進行洗脫,。
收集全部洗脫液,，45℃下氮吹至 100 μL 左右，加入 0.1%甲酸溶液定容至1mL,過 PTFE 親水濾膜,，上機測試,。
3.基質(zhì)標準曲線溶液的制備
取 6 個空白基質(zhì)樣品同正常樣品一樣操作，收集洗脫液后,，于洗脫液中分別加入適量標液,，再與其他樣品洗脫液一同氮吹，定容,，使最終上機溶液的濃度分別為 2 μg/L,、10 μg/L、50 μg/L,、100 μg/L,、200 μg/L、500 μg/L,。
4.儀器條件
(1)色譜條件
儀器：UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TSQ Endura)
色譜柱：Hypersil GOLD C18 (2.1 mm×100 mm,，1.9 μm)
流動相：A：水(0.1 %甲酸) B：甲醇：乙腈=2:8(0.1 %甲酸)
洗脫方式：梯度洗脫，見表 1
流速：0.3 mL/min
柱溫：35℃
進樣量：10 μL
(2)質(zhì)譜條件
子源：HESI
電噴霧電壓：3500 V
鞘氣壓力：40 arb
輔氣壓力：2 arb
離子傳輸管：380 ℃
輔氣溫度：350 ℃
5.實驗結(jié)果
圖1 添加水平為100.0 μg/kg 時豬肉中獸殘的總離子流圖
圖2 添加水平為100.0 μg/kg 時雞肉中獸殘的總離子流圖
優(yōu)化 Tips：
1.在提取過程中降低離心的溫度至-5℃可以更好的抑制樣品中的脂肪在水溶液表面的分散,，有利于樣品的提取轉(zhuǎn)移,。
2.在超聲提取完合并兩次的提取液之后,，再進行一次離心，更好的去除基質(zhì)的影響,，便于上樣過柱,。
3.在淋洗過程中使用 5 mL 5%甲醇-水溶液淋洗液，可以減少在淋洗過程中部分目標物的損失,。
4.標準中氮吹至 100 μL 左右,，不氮吹干可以減少在氮吹過程中部分目標化合物的損失。
5.復(fù)溶時,，加入 0.1%甲酸溶液定容至 1 mL,可以有效的改善部分目標化合物的峰型,，同時提高部分化合物的回收率。6.為了改善上樣后的流速問題,，使用 Clover ® HLB( 貨號：HLB2006-M)較普通的 HLB 凈化柱可以獲得更好的流速,。
6.訂購信息