嘔吐毒素親和柱的原理和使用注意事項(xiàng)

原理

樣品經(jīng)提取液提取,、過(guò)濾,、稀釋?zhuān)缓笸ㄟ^(guò)鍵合有嘔吐毒素特殊抗體的免疫親和柱,。此時(shí),，嘔吐毒素被親和柱中的抗體特異性的吸附,，用水或緩沖液將免疫親和柱IAC-SEP上的雜質(zhì)除去,，然后用甲醇使抗體變性，從而將嘔吐毒素從親和柱上洗脫下來(lái),。最后,，用HPLC或熒光計(jì)進(jìn)行定量檢測(cè)

注意事項(xiàng)

1. 使用前，免疫親和柱需回至室溫（22～25℃）,。

2. 樣品添加回收試驗(yàn)時(shí),，標(biāo)準(zhǔn)品添加到樣品中，靜置2小時(shí)后或過(guò)夜,，再進(jìn)行樣品前處理,，否則會(huì)出現(xiàn)回收率偏低的現(xiàn)象。

3)     操作步驟中,，樣品過(guò)柱,，淋洗，洗脫時(shí),，一定要控制好流速,，不能太快，否則會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏低,。

4)     如果將標(biāo)準(zhǔn)品直接過(guò)柱驗(yàn)證回收率時(shí),，一定要確保標(biāo)準(zhǔn)上柱液中甲醇濃度不要超過(guò)5%，否則會(huì)影響柱子的吸附能力,。

5)     試驗(yàn)中使用的玻璃儀器等,，一定要清洗干凈,，尤其是用次氯酸等處理過(guò)的儀器，否則會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏低,。

6)     當(dāng)用氮?dú)鉂饪s洗脫液時(shí),，氮?dú)饬鞑灰螅駝t會(huì)損失部分嘔吐毒素,。