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Clover®酶聯(lián)免疫試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)的必要性,，通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)可以熟悉整個(gè)實(shí)驗(yàn)的流程，發(fā)現(xiàn)可能忽略的問(wèn)題,；可以測(cè)試樣本和試劑盒是否匹配,，一旦出現(xiàn)不匹配的情況，不至于浪費(fèi)過(guò)多樣本；可以對(duì)樣品中目的分析物的濃度作一下大致參考,，以確定合適稀釋度,。

　　一、Clover®酶聯(lián)免疫試劑盒使用注意事項(xiàng)：

1. 室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫（20- 25℃）會(huì)導(dǎo)致數(shù)值偏低,。

2. 在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥過(guò)久的情況,，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象,。所以洗板排干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作,。

3. 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和顯色液對(duì)光敏感，避免直接暴露在光線下,。

4. 混合要均勻,，洗板要*（包括加樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的時(shí)候都必需充分混合均勻）。

5. 終止液為強(qiáng)酸性物質(zhì),，避免接觸皮膚,。

6. 不要使用過(guò)了有效期的試劑盒，也不要混合使用不同批次的試劑盒,，這樣會(huì)引起測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確,。

7. 試劑盒的儲(chǔ)存條件是2-8℃，切勿冷凍,。

   　　二、剩余試劑的妥善保存：

   酶聯(lián)免疫試劑盒恢復(fù)至室溫后,，取出要使用的酶標(biāo)板孔,，未使用的酶標(biāo)板孔應(yīng)及時(shí)放回鋁箔袋，加入干燥劑,，封緊封口,，冷藏保存。

   試劑盒常用檢測(cè)方法簡(jiǎn)介

   ELISA試劑盒一般適合樣品檢測(cè)量大,，實(shí)驗(yàn)室中常用于初篩的檢測(cè)方法,。若檢測(cè)到陽(yáng)性樣本，再用確認(rèn)方法做準(zhǔn)確定量,。

   試劑盒檢測(cè)方法及優(yōu)點(diǎn)介紹：

   A,、間接法：此測(cè)定方法與直接法類似，差別在于一級(jí)抗體沒(méi)有酶標(biāo)記,，改用酶標(biāo)記的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原量,。

   優(yōu)勢(shì)：二抗可以加強(qiáng)信號(hào)，而且有多種選擇能做不同的測(cè)定分析,，不加酶標(biāo)記的一級(jí)抗體則能保留它最多的免疫反應(yīng)性,。

   B、直接法：將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標(biāo)記的一級(jí)抗體,，即可測(cè)定抗原總量,，此一級(jí)抗體的特異性非常重要。

   優(yōu)勢(shì)：操作手續(xù)簡(jiǎn)短,，因無(wú)須使用二抗可避免交互反應(yīng),。

   C、雙抗體夾心法：被檢測(cè)的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,，其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,，即捕捉抗體，另一個(gè)則是檢測(cè)抗體,，此抗體可用酶標(biāo)記后直接測(cè)定抗原的量,，或不標(biāo)記，再透過(guò)酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量,，這兩種抗體必須小心選取,，才可避免交互反應(yīng)或競(jìng)爭(zhēng)相同的抗原結(jié)合部位。