展青霉素又稱(chēng)展青霉毒素,、棒曲霉素,、珊瑚青霉毒素,，它是一由曲霉和青霉等真菌產(chǎn)生的一種次級(jí)代謝產(chǎn)物,，棒曲霉素具有廣譜的抗生素特點(diǎn),。展青霉素是一種世界范圍內(nèi)的水果污染物，在多種水果,、水果制品和果酒中均有發(fā)現(xiàn),，對(duì)人及動(dòng)物具有較強(qiáng)的毒性作用。當(dāng)人攝取了展青霉素,，可通過(guò)影響細(xì)胞膜的透過(guò)性間接地引起生理呼吸異常,。鑒于展青霉素的毒性及其污染情況，開(kāi)展展青霉素的檢測(cè)非常必要,。

中檢維康研發(fā)的Clover- SepMyco 228多功能固相凈化柱,，展青霉素固相凈化柱，該方法符合GB 5009.185-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中展青霉素的測(cè)定,，操作簡(jiǎn)便快捷,，與國(guó)內(nèi)外的其他產(chǎn)品相比，具有回收率高,，凈化效果好等優(yōu)點(diǎn),。

操作方法如下：

Clover- SepMyco 228多功能固相凈化柱

高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)展青霉素

參考標(biāo)準(zhǔn)

2  GB 5009.185-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中展青霉素的測(cè)定

試劑配制

2  乙酸溶液:取10mL乙酸加入250mL水,混勻。

2  果膠酶(液體):活性 ≥1500U / g , 2℃~8℃ 避光保存,。(P/N: Clover 228-01)

樣品提取

2  液體試樣(蘋(píng)果汁,、山楂汁等)

稱(chēng)取4g試樣(準(zhǔn)確至0.01g)于50mL離心管中,加入21mL乙腈,混合均勻,在6000r/min下離心5min,待凈化。

2  固體,、半流體試樣(山楂片,、果丹皮、蘋(píng)果果泥,、蘋(píng)果果醬,、帶果粒果汁等)

稱(chēng)取1g試樣(準(zhǔn)確至0.01g)于50mL離心管中,再加入10mL水與150μL果膠酶溶液混勻,室溫下避光放置過(guò)夜后,加入10.0mL乙酸乙酯,渦旋 混合5min,在6000r/min下離心5min,移取乙酸乙酯層至梨形燒瓶,。再用10.0mL乙酸乙酯提取一次,合并兩次乙酸乙酯提取液,在40℃水浴中用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至干,以2.0mL乙酸溶液溶解殘留物, 再加入8mL乙腈,混勻后待凈化。

樣品凈化

將提取液通過(guò)凈化柱凈化,棄去初始的1mL凈化液,收集后續(xù)部分,。用吸量管準(zhǔn)確吸取5.0mL凈化液,加入20μL乙酸,在40℃下用氮?dú)饩従彽卮抵两?/span>,加入乙酸溶液定容至1mL,渦旋30s溶解殘?jiān)?/span>,過(guò)0.22μm 濾膜,收集濾液于進(jìn)樣瓶中以備進(jìn)樣,。

液相色譜條件

2  色譜柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）或4.6*250mm（5um）

2  流動(dòng)相：乙腈-水（5+95，v/v）或甲醇-水（10+90,，v/v）

2  流速：0.8mL/min

2  檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器,，波長(zhǎng)276nm

2  進(jìn)樣體積：20~100uL

2  柱溫：40℃

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