高效液相色譜柱的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器,、泵,、進(jìn)樣器、色譜柱,、檢測(cè)器,、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,，被流動(dòng)相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)， 經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過(guò)程,，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出， 通過(guò)檢測(cè)器時(shí),，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。

高效液相色譜柱怎么裝柱：

1. 色譜柱應(yīng)該是可以直接接在勻漿罐上的,，如果不能,，則需要一個(gè)轉(zhuǎn)換接頭。這個(gè)轉(zhuǎn)換接頭的尺寸很重要,，既要能防止漏液,，又要避免過(guò)硬或尺寸不合適而導(dǎo)致色譜柱接口螺紋的損壞；

2. 具體裝柱過(guò)程一般來(lái)說(shuō)是①先以合適的勻漿液（多為有機(jī)溶劑,，劉國(guó)詮老師的《色譜柱技術(shù)》一書(shū)中列的比較全,，可供參考）將填料充分分散（可以借助攪拌、超聲等方式）,；②在填料勻漿的過(guò)程中,，完成準(zhǔn)備工作，即把色譜柱接在勻漿罐的下端（色譜柱不接勻漿罐的一段要接好篩板和柱頭,，確保擰緊但不能擰死以免損壞色譜柱）,，打開(kāi)勻漿罐上端和氣泵之間的接頭以便灌入勻漿液；③勻漿液罐好后,，接好勻漿罐上端接頭，開(kāi)始加壓,；④選擇合適的壓力,，就可以把填料壓實(shí)了；⑤穩(wěn)定在適當(dāng)?shù)膲毫ι蠅阂欢〞r(shí)間后,，卸掉壓力,，卸下色譜柱，把接勻漿罐這一段的填料抹平,，裝上篩板和柱頭即可使用,。

3. 裝柱是個(gè)困難的過(guò)程，需要耐心摸索壓力,、勻漿液體積等參數(shù),，才能確保柱床均勻密實(shí)，達(dá)到**柱效和峰形,。如果裝的不好,，則可能出現(xiàn)柱效不夠，或拖尾等問(wèn)題。

高效液相色譜柱的選擇：

看你的流動(dòng)相而定,。

正相和反相是根據(jù)固定相和流動(dòng)相的極性差異定義的,。正相是固定相極性大，反相是流動(dòng)相極性大,，而樣品的分離情況與極性直接關(guān)聯(lián),。

像氰基柱和氨基柱，都是正相反相都可以用,，主要區(qū)分是根據(jù)你的流動(dòng)相,。如果你的流動(dòng)相中是水、甲醇,、乙腈這些東西,，那肯定是反相的。如果是正己烷,、乙醇,、四氫呋喃這些東西作為流動(dòng)相，那基本就是正相的,。

個(gè)人建議,，使用反相色譜柱，不要使用正相的流動(dòng)相,。

第一：你色譜柱的填料不同,，跑出來(lái)的色譜峰可能*不同。檢測(cè)方法不可取,。

第二：反相色譜柱沖入像是四氫呋喃這類的物質(zhì),，很有可能導(dǎo)致填料坍塌。