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NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)細菌鑒定中的應(yīng)用方向

細菌屬于原核生物的一種,，雖然結(jié)構(gòu)相對簡單，但是在生物界屬于數(shù)量最多的一類生物,。細菌在生物界扮演著多重角色，既有乳品生產(chǎn),、抗生素生產(chǎn),、廢水處理等積極的一面，也有作為病原菌感染人和牲畜從而導致疾病傳播的危害一面,。所以了解和控制細菌的特征和特性,，對日常生產(chǎn)生活至關(guān)重要。

實驗室條件下,，細菌的鑒定主要有培養(yǎng),、生化鑒定、血清學鑒定等,，但是這些方法均費時費力,，尤其是細菌培養(yǎng)。而分子生物學方法是近年來更多被應(yīng)用的方法,，例如PCR技術(shù),。該技術(shù)對不易生長，培養(yǎng)條件復(fù)雜,，未知細菌等表現(xiàn)良好,。總結(jié)發(fā)現(xiàn)PCR在細菌中的應(yīng)用包括以下方向：

1,、基于16S rDNA基因的快速鑒定,；

2、特異性基因的鑒定,，例如毒力基因,、耐藥基因等；

3,、食品微生物檢測,；

4、細菌數(shù)量動態(tài)檢測,；

5,、常見呼吸道病原菌篩查；

6,、細菌DNA圖譜制作等,。

對于實驗室工作人員來說，細菌難培養(yǎng),，細菌增殖數(shù)量不夠,，環(huán)境中細菌復(fù)雜程度高等難點,。而能夠成功培養(yǎng)到目標細菌，且數(shù)量達標是PCR的關(guān)鍵前提,。目前實驗室工作人員常用細菌DNA柱式提取試劑盒進行基因組DNA的提取純化,。該方法作為經(jīng)典方法長期被使用，但是整個操作過程需要40-90分鐘不等,，使用溶菌酶和蛋白酶K等生物活性酶類,，多次反復(fù)離心，步驟繁多,、使初學的操作者體驗樂趣嚴重降低,。我司開發(fā)的NuSmart^®微生物 PCR 試劑盒che底解決以上痛點問題。優(yōu)點如下：

—對樣本量要求低（1-2uL菌液,，1個菌斑）

—操作快速（5分鐘釋放基因組DNA）

—操作簡單

—檢出率達99.99%

案例A 對數(shù)生長期細菌快速擴增16S rDNA

 

革蘭氏陰性菌：1 大腸桿菌 2 胞曼氏不動桿菌 3 肺炎克雷伯菌 4 奇異變形桿菌 5 銅綠假單胞菌

革蘭氏陽性菌：6 蠟狀芽孢桿菌 7 糞腸球菌 8 肺炎鏈球菌 9 金黃色葡萄球菌 10 假中間葡萄球菌

使用NuSmart^®微生物 PCR 試劑盒（貨號Nu-Mi01）處理對數(shù)生長期菌液,，2× MIC Smart Mix擴增16S rDNA基因。

 

 

案例B 單菌落快速擴增16S rDNA

 

 

革蘭氏陰性菌：1 大腸桿菌 2 胞曼氏不動桿菌 3 肺炎克雷伯菌 4 奇異變形桿菌 5 銅綠假單胞菌

革蘭氏陽性菌：6 蠟狀芽孢桿菌 7 糞腸球菌 8 肺炎鏈球菌 9 金黃色葡萄球菌 10 假中間葡萄球菌

使用NuSmart^®微生物 PCR 試劑盒（貨號Nu-Mi01）處理菌斑（至于生理鹽水中）,，2× MIC Smart Mix擴增16S rDNA基因,。

 

 

案例C 甘油菌快速擴增16S rDNA

 

革蘭氏陰性菌：1 大腸桿菌 2 胞曼氏不動桿菌 3 肺炎克雷伯菌 4 奇異變形桿菌 5 銅綠假單胞菌

革蘭氏陽性菌：6 蠟狀芽孢桿菌 7 糞腸球菌 8 肺炎鏈球菌 9 金黃色葡萄球菌 10 假中間葡萄球菌

使用NuSmart^®微生物 PCR 試劑盒（貨號Nu-Mi01）處理甘油菌，2× MIC Smart Mix擴增16S rDNA基因,。