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NuSmart®在FFPE(福爾馬林固定石蠟包埋)鑒定中應(yīng)用
閱讀:377 發(fā)布時(shí)間:2024-9-4NuSmart®在FFPE(福爾馬林固定石蠟包埋)鑒定中應(yīng)用
——無(wú)需脫蠟,、一片即結(jié)果
FFPE是"福爾馬林固定,、石蠟包埋"(Formalin-Fixed and Paraffin-Embedded)的縮寫,是一種常見的組織樣本保存方法,。在醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中,,F(xiàn)FPE可用于組織學(xué)檢查、病理診斷和分子分析,。而FFPE在分子分析中的應(yīng)用主要包括:
1,、癌癥研究:FFPE樣本常用于癌癥基因組學(xué)研究,包括突變分析,、拷貝數(shù)變異檢測(cè)等,。
2、基因表達(dá)分析:FFPE樣本中的RNA可用于基因表達(dá)分析,,了解疾病相關(guān)基因的表達(dá)模式,。
3、DNA甲基化分析:FFPE樣本可用于研究DNA甲基化狀態(tài),,探索與疾病相關(guān)的表觀遺傳學(xué)改變,。
4、miRNA分析:FFPE樣本中的miRNA可用于研究其在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用,。
5,、生物銀行和歷史樣本研究:利用存儲(chǔ)的歷史FFPE樣本進(jìn)行生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證研究。
愿望是美好的,,現(xiàn)實(shí)是提取FFPE中DNA存在很多“痛處",,例如
1、DNA損傷和化學(xué)修飾:福爾馬林固定導(dǎo)致DNA發(fā)生化學(xué)修飾,,如堿基脫嘌呤,、鏈間交聯(lián)等。
2,、DNA片段化:FFPE樣本中的DNA通常已部分降解,,形成較小的片段,這可能影響某些需要較長(zhǎng)DNA片段的實(shí)驗(yàn),。
3,、DNA與蛋白質(zhì)的交聯(lián):DNA可能與組蛋白等蛋白質(zhì)緊密交聯(lián),增加了提取和純化的難度,。
4,、樣品質(zhì)量控制:組織脫水,、固定延遲或時(shí)間過長(zhǎng)等因素都會(huì)損害標(biāo)本質(zhì)量。
5,、DNA提取效率:目前市場(chǎng)的FFPE提取試劑盒性能差異很大,,提取時(shí)間和提取效率都有很大不同。
6,、PCR抑制劑:FFPE樣本中可能存在PCR抑制劑,,影響后續(xù)的PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
NuSmart®技術(shù)wan美解決以上痛點(diǎn),,NuSmart®FFPE樣本PCR試劑盒提供了FFPE Buffer用于將切片中組織DNA釋放出來(lái),,高耐受力的2× FFPE Smart Mix能夠抑制常見干擾劑??偨Y(jié)來(lái)看有以下特點(diǎn):
—1-2片切片就有結(jié)果
—操作簡(jiǎn)單,,無(wú)需脫蠟
—操作便捷,僅需要10分鐘
—僅需要加熱處理
—無(wú)需配備昂貴設(shè)備
操作流程
案例 不同組織切片擴(kuò)增8對(duì)引物
1,、肝 2,、肺 3、胃
使用NuSmart®FFPE樣本PCR試劑盒(貨號(hào)Nu-FFPE0101)處理肝,、肺,、胃三組切片,使用2× FFPE Smart Mix擴(kuò)8對(duì)引物,。